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一种降低红曲中桔霉素含量及制备红曲酒的方法   0    0

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专利申请流程有哪些步骤?
专利申请流程图
申请
申请号:指国家知识产权局受理一件专利申请时给予该专利申请的一个标示号码。唯一性原则。
申请日:提出专利申请之日。
2017-12-12
申请公布
申请公布指发明专利申请经初步审查合格后,自申请日(或优先权日)起18个月期满时的公布或根据申请人的请求提前进行的公布。
申请公布号:专利申请过程中,在尚未取得专利授权之前,国家专利局《专利公报》公开专利时的编号。
申请公布日:申请公开的日期,即在专利公报上予以公开的日期。
2018-04-13
授权
授权指对发明专利申请经实质审查没有发现驳回理由,授予发明专利权;或对实用新型或外观设计专利申请经初步审查没有发现驳回理由,授予实用新型专利权或外观设计专利权。
2020-10-30
预估到期
发明专利权的期限为二十年,实用新型专利权期限为十年,外观设计专利权期限为十五年,均自申请日起计算。专利届满后法律终止保护。
2037-12-12
基本信息
有效性 有效专利 专利类型 发明专利
申请号 CN201711322675.8 申请日 2017-12-12
公开/公告号 CN107815375B 公开/公告日 2020-10-30
授权日 2020-10-30 预估到期日 2037-12-12
申请年 2017年 公开/公告年 2020年
缴费截止日
分类号 C12N1/14C12G3/026C12G3/055C12R1/645 主分类号 C12N1/14
是否联合申请 独立申请 文献类型号 B
独权数量 1 从权数量 7
权利要求数量 8 非专利引证数量 1
引用专利数量 0 被引证专利数量 0
非专利引证 1、CN 102311904 A,2012.01.11CN 104758319 A,2015.07.08KR 20090084074 A,2009.08.05王鹏.提高小曲微生物发酵性能的研究《.中国优秀硕士学位论文全文数据库》.2015,(第2期),第24页最后1段. 陈小原等.月见草花黄色素的稳定性测定. 《吉首大学学报( 自然科学版)》.2006,第27卷(第4期),第98页最后1段.;
引用专利 被引证专利
专利权维持 5 专利申请国编码 CN
专利事件 事务标签 公开、实质审查、授权
申请人信息
申请人 第一申请人
专利权人 湖北工业大学 当前专利权人 湖北工业大学
发明人 薛栋升、周方谱、曾徐浩 第一发明人 薛栋升
地址 湖北省武汉市武昌区南湖李家墩1村1号 邮编 430068
申请人数量 1 发明人数量 3
申请人所在省 湖北省 申请人所在市 湖北省武汉市
代理人信息
代理机构
专利代理机构是经省专利管理局审核,国家知识产权局批准设立,可以接受委托人的委托,在委托权限范围内以委托人的名义办理专利申请或其他专利事务的服务机构。
武汉科皓知识产权代理事务所 代理人
专利代理师是代理他人进行专利申请和办理其他专利事务,取得一定资格的人。
彭劲松
摘要
本发明公开了一种降低红曲中桔霉素含量及制备红曲酒的方法。降低红曲中桔霉素含量的方法,包括如下步骤:将经超声破碎处理的酱香型大曲、清香型高温大曲、清香型中温酒曲、浓香型酒曲复配得到预处理酒曲复配曲;将上述未经超声破碎处理的酒曲复配得到原酒曲复配曲;再将两者复配得到终酒曲混合曲;将月见草花粉末经蒸汽爆破处理后加到水中,并加入漆酶进行酶解处理,得到预处理的月见草花液;将活化后的红曲霉种子液接种到培养液中,发酵2‑2.5d;再加入最终混合酒曲和预处理月见草花液,发酵5‑6d,得到桔霉素含量降低的红曲霉发酵液。将发酵液过滤后与清香型基酒勾兑得到红曲酒。本发明通过控制红曲霉的代谢降低了红曲中桔霉素含量。
  • 摘要附图
    一种降低红曲中桔霉素含量及制备红曲酒的方法
法律状态
序号 法律状态公告日 法律状态 法律状态信息
1 2020-10-30 授权
2 2018-04-13 实质审查的生效 IPC(主分类): C12G 3/02 专利申请号: 201711322675.8 申请日: 2017.12.12
3 2018-03-20 公开
权利要求
权利要求书是申请文件最核心的部分,是申请人向国家申请保护他的发明创造及划定保护范围的文件。
1.一种降低红曲中桔霉素含量的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)酒曲的制备
将经超声破碎处理的酱香型大曲、清香型高温大曲、清香型中温酒曲、浓香型酒曲按质量比0.7-1:1-1.2:4-5:2-2.5的比例复配,得到预处理酒曲复配曲;
将酱香型大曲、清香型高温大曲、清香型中温酒曲、浓香型酒曲按质量比1-1.2:2-2.3:
3.5-4:1-1.2的比例复配,得到原酒曲复配曲;
将预处理酒曲复配曲与原酒曲复配曲按质量比7-9:1的比例复配,得到最终酒曲混合曲;
(2)月见草花的预处理
月见草花超声破碎成粉末,月见草花粉末经蒸汽爆破处理后加到其质量3-4倍质量的水中,并加入漆酶进行酶解处理,得到预处理的月见草花液;
(3)发酵
将红曲霉种子液接种到培养液中,发酵2-2.5d;再加入发酵醪液质量1-3%的最终混合酒曲和0.3-0.5%的预处理月见草花液,发酵5-6d,得到桔霉素含量降低的红曲霉发酵液。

2.根据权利要求1所述的降低红曲中桔霉素含量的方法,其特征在于:步骤(2)中,蒸汽爆破的条件为1.5MPa保压6-8min,爆破3-5次。

3.根据权利要求1所述的降低红曲中桔霉素含量的方法,其特征在于:步骤(2)中,漆酶的加入量为月见草花粉末质量的1-3%,酶解的条件为30-35℃保温2-4h。

4.根据权利要求1所述的降低红曲中桔霉素含量的方法,其特征在于:步骤(3)中所述的培养液的配方为:麦芽粉20-25g,蛋白胨1-2g,葡萄糖2-3g,MgSO4 0.5g,1000mL水,pH 
5.8。

5.根据权利要求1所述的降低红曲中桔霉素含量的方法,其特征在于:步骤(3)中,发酵的温度为30-35℃。

6.一种制备红曲酒的方法,其特征在于:包括如下步骤:将通过权利要求1-5任一项所述的方法得到的红曲霉发酵液过滤,所得滤液与清香型基酒进行勾兑,得到红曲酒。

7.根据权利要求6所述的制备红曲酒的方法,其特征在于:所述的清香型基酒的度数为
60度。

8.根据权利要求6或7所述的制备红曲酒的方法,其特征在于:红曲霉发酵液过滤所得滤液与清香型基酒的勾兑体积比为2:7。
说明书

技术领域

[0001] 本发明属于酿造工程领域,具体涉及一种降低红曲中桔霉素含量及制备红曲酒的方法。

背景技术

[0002] 红曲色素是红曲霉在生长代谢过程中产生的天然色素,由于其具有色泽鲜红、着色力强、稳定性好、口味自然等优点,在我国广泛用于食品的着色。红曲色素还具有多种生物活性,如对一些条件诱发致癌效应有明显的抑制作用。1995年法国学者BLANC P J等证实红曲菌(Monascus purpureus)CBS 109.07和(Monascus ruber van Tieghem)在色素代谢的同时也产生Monascidin A,并证实该物质为真菌毒素-桔霉素,从而引起了人们对红曲色素安全性的关注。桔霉素又称桔青霉素,最初于20世纪30年代发现由青霉菌产生,被当作抗生素高度重视,后因发现其具有肾毒性,排除了将其作为治疗用抗生素的可能,并认定为真菌毒素。桔霉素的靶器官是肾脏,服入桔霉素会引起各种实验动物的肾脏毒性,其特征是肾脏变大,最终导致肾衰竭。还有研究发现,桔霉素有致畸作用,损害肝的代谢,有致癌性和诱发突变作用,并可能对中枢神经系统产生抑制。
[0003] 欧盟(European Union,EU)发布No 212/2014号法规,对(EC)No 1881/2006做出了修订,补充了关于食品中污染物桔霉素在红曲霉发酵大米食品补充剂中的最大限量值为2mg/kg,这个限量值将会根据其他食品中桔霉素的风险评估和桔霉素的毒性作进一步审核。红曲色素在欧盟及美国迟迟没有被批准为食品添加剂,很大程度上是由于桔霉素含量问题得不到有效控制而导致的。
[0004] 我国红曲生产与应用历史悠久、规模不断扩大,但是由于桔霉素在红曲产品中不能得到有效控制,导致红曲产品存在潜在的安全性问题,并对我国红曲的对外出口贸易造成极大的限制。因此,寻求降低红曲产品中桔霉素含量的方法成为解决上述问题的关键。

发明内容

[0005] 本发明的目的在于克服现有技术存在的问题,提供一种降低红曲中桔霉素含量的方法。本发明的目的还在于提供一种制备红曲酒的方法。
[0006] 本发明的目的通过下述技术方案实现:
[0007] 一种降低红曲中桔霉素含量的方法,包括如下步骤:
[0008] (1)酒曲的制备
[0009] 将经超声破碎处理的酱香型大曲、清香型高温大曲、清香型中温酒曲、浓香型酒曲按质量比0.7-1:1-1.2:4-5:2-2.5的比例复配,得到预处理酒曲复配曲。
[0010] 将酱香型大曲、清香型高温大曲、清香型中温酒曲、浓香型酒曲按质量比1-1.2:2-2.3:3.5-4:1-1.2的比例复配,得到原酒曲复配曲。
[0011] 将预处理酒曲复配曲与原酒曲复配曲按质量比7-9:1的比例复配,得到最终酒曲混合曲。
[0012] (2)月见草花的预处理
[0013] 月见草花超声破碎成粉末,月见草花粉末经蒸汽爆破处理后加到其质量3-4倍质量的水中,并加入漆酶进行酶解处理,得到预处理的月见草花液。
[0014] (3)发酵
[0015] 将红曲霉种子液接种到培养液中,发酵2-2.5d;再加入发酵醪液质量1-3%的最终混合酒曲和0.3-0.5%的预处理月见草花液,发酵5-6d,得到桔霉素含量降低的红曲霉发酵液。
[0016] 步骤(2)中,蒸汽爆破的条件优选为1.5MPa保压6-8min,爆破3-5次;漆酶的加入量优选为月见草花粉末质量的1-3%,酶解的条件优选为30-35℃保温2-4h。
[0017] 步骤(3)中所述的培养液的配方优选为:麦芽粉20-25g,蛋白胨1-2g,葡萄糖2-3g,MgSO4 0.5g,1000mL水,pH 5.8。
[0018] 步骤(3)中,发酵的温度优选为30-35℃,转速优选为130-160r/min。
[0019] 一种制备红曲酒的方法,包括如下步骤:将上述方法得到的红曲霉发酵液过滤所得滤液与清香型基酒进行勾兑,得到红曲酒。优选的,所述的清香型基酒的度数为60度;红曲霉发酵液过滤所得滤液与清香型基酒的勾兑体积比为2:7。
[0020] 本发明利用创新的工艺,通过添加混合酒曲及经爆破、漆酶酶解的月见草花等,来有效控制红曲霉的代谢,降低红曲中的桔霉素含量,并配制得到略带浓香风味的红曲酒。

实施方案

[0021] 以下实施例用于进一步说明本发明,但不应理解为对本发明的限制。若未特别指明,实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
[0022] 实施例1
[0023] 1、材料和设备
[0024] 红曲霉:红曲霉CCTCC AF93208。酱香型大曲、清香型高温大曲、清香型中温酒曲:都购自梁山长久生物制曲有限公司。浓香型酒曲:泸州市龙马潭区瑞华生物制曲有限公司。
漆酶:上海鼓臣生物技术有限公司。
[0025] JXZD系列超微粉碎机:安丘市经欣粉体加工设备有限公司。超声波破碎仪LC-N-4.3:宁波立诚仪器有限公司。蒸汽爆破机QB-200:鹤壁市正道重机厂。
[0026] 2、方法
[0027] (1)培养基的配制
[0028] 红曲霉种子培养液:蔗糖10g,蛋白胨3g,K2HPO4 0.5g,1000mL水,pH 5.8,121℃灭菌20min。
[0029] 红曲霉发酵培养液:麦芽粉20g,蛋白胨1g,葡萄糖2g,MgSO4 0.5g,1000mL自来水,pH 5.8,121℃灭菌20min。
[0030] (2)酒曲的制备
[0031] 酱香型大曲、清香型高温大曲、清香型中温酒曲、浓香型酒曲分别用超声波破碎仪超声破碎20min,得到预处理的酱香型大曲、清香型高温大曲、清香型中温酒曲、浓香型酒曲。
[0032] 预处理酒曲复配曲的制备:将预处理酱香型大曲、预处理清香型高温大曲、预处理清香型中温酒曲、预处理浓香型酒曲按质量比1:1:4:2的比例复配,得到预处理酒曲复配曲。
[0033] 原酒曲复配曲的制备:将酱香型大曲、清香型高温大曲、清香型中温酒曲、浓香型酒曲按质量比1:2:4:1的比例复配,得到原酒曲复配曲。
[0034] 最终酒曲混合曲的制备:将预处理酒曲复配曲与原酒曲复配曲按质量比9:1的比例复配,得到最终酒曲混合曲。
[0035] (3)月见草花的预处理
[0036] 将市售月见草花用超声波破碎仪超微粉碎。粉碎的粉末放入蒸汽爆破机中,于1.5MPa保压6min,爆破3次。往爆破的月见草花粉末加入其质量0.1%的漆酶,加入爆破的月见草粉末3倍质量的水,35℃保温2h,得到预处理的月见草花液。
[0037] (4)发酵
[0038] 红曲霉活化:往红曲霉CCTCC AF93208试管斜面菌种中加入5mL无菌水,用接种针搅拌后接入到装有50mL种子培养液的250mL三角瓶中,35℃160r/min培养24h得到红曲霉种子液。
[0039] 红曲霉液态发酵:取2mL红曲霉种子液接入到装有50mL发酵培养液的250mL三角瓶中,35℃、160r/min发酵2d,然后加入发酵醪液质量1%的最终混合酒曲、加入发酵醪液质量0.3%的预处理月见草花液,35℃、160r/min再发酵6d,得到红曲霉发酵液。
[0040] (4)红曲霉发酵液色价和桔霉素含量的测定
[0041] 1)色素色价的测定
[0042] 醇溶性色素色价测定方法:红曲霉发酵液于5000r/min离心10min,取上清液,用70%乙醇稀释一定倍数后,60℃水浴1h,过滤;滤液再用70%乙醇稀释一定倍数后,分别测定OD505、OD465、OD410,按照色价=OD×稀释倍数/所取得发酵液体积,计算得到醇溶性红色、橙色、黄色色素的色价。
[0043] 水溶性色素色价测定方法:红曲霉发酵液于5000r/min离心10min,取上清液,用蒸馏水稀释一定倍数后,60℃水浴1h,过滤;滤液再用蒸馏水稀释一定倍数后,分别测定OD505、OD465、OD410,按照色价=OD×稀释倍数/所取得发酵液体积,计算得到水溶性红色、橙色、黄色色素的色价。
[0044] 总色价为醇溶性色素色价与水溶性色素色价的和。
[0045] 2)桔霉素含量的测定
[0046] 取红曲霉发酵液10mL于5000r/min离心10min,往上清液中加入20mL 70%乙醇溶液混匀,用0.22μm微孔滤膜过滤后依据国家标准GB/T 5009.222-2008进行高效液相色谱检测。
[0047] 测定结果为:红曲霉发酵液中色价为2.97U/mL,桔霉素含量为0.0165mg/mL。
[0048] (5)红曲酒配制
[0049] 红曲霉发酵液先5000r/min离心15min,然后用滤纸过滤,滤液与清香型基酒(四川百世缘酒业有限公司,60度)按照体积比2:7的比例勾兑,得到色泽微红、口感柔和饱满、略带浓香风味的清香型保健红曲酒。
[0050] 对比试验1
[0051] 参照实施例1,发酵2d后,发酵醪液中不加入最终混合酒曲,其它操作同实施例1,测定的红曲霉发酵液中色素浓度为2.82U/mL、桔霉素含量为0.0173mg/mL。
[0052] 对比试验2
[0053] 参照实施例1,发酵2d后,发酵醪液中加入的最终混合酒曲改为加入相同用量的原酒曲复配曲,其它操作同实施例1,测定的红曲霉发酵液中色素浓度为2.10U/mL、桔霉素含量为0.0166mg/mL。
[0054] 对比试验3
[0055] 参照实施例1,发酵2d后,发酵醪液中加入的最终混合酒曲改为加入如下不同情况的酒曲:
[0056] 加入发酵醪液质量0.9%的预处理酱香型大曲和0.1%的酱香型大曲;
[0057] 加入发酵醪液质量0.9%的预处理清香型高温大曲和和0.1%的清香型高温大曲;
[0058] 加入发酵醪液质量0.9%的预处理清香型中温大曲和0.1%的清香型中温大曲;
[0059] 加入发酵醪液质量0.9%的预处理浓香型大曲和0.1%的浓香型大曲。
[0060] 其它操作同实施例1,测定的红曲霉发酵液中色素浓度和桔霉素含量对应为:色素浓度为2.12U/mL,桔霉素含量为0.0179mg/mL;色素浓度为2.10U/mL,桔霉素含量为0.0176mg/mL;色素浓度为2.69U/mL,桔霉素含量为0.0168mg/mL;色素浓度为1.98U/mL,桔霉素含量为0.0191mg/mL。
[0061] 对比试验4
[0062] 参照实施例1,发酵2d后,发酵醪液中不加入预处理月见草花液,其它操作同实施例1,测定的红曲霉发酵液中色素浓度为2.92U/mL、桔霉素含量为0.021mg/mL。
[0063] 对比试验5
[0064] 参照实施例1,发酵2d,发酵醪液中加入相同用量的超微粉碎的月见草花液(未经汽爆处理和漆酶处理),其它操作同实施例1,测定的红曲霉发酵液中色素浓度为2.91U/mL、桔霉素含量为0.019mg/mL。
[0065] 对比试验6
[0066] 参照实施例1,发酵2d,不加入终混合酒曲和预处理月见草花液,继续发酵6d,其它操作同实施例1,测定的红曲霉发酵液中色素浓度为2.81U/mL、桔霉素含量为0.022mg/mL。
[0067] 对比试验7
[0068] 参照实施例1,发酵2d后,发酵醪液中加入终混合酒曲和预处理月见草花液改为加入发酵醪液质量1.6%的酵母液,其它操作同实施例1,测定的红曲霉发酵液中色素浓度为3.11U/mL、桔霉素含量为0.0171mg/mL。
[0069] 其中,酵母液通过如下处理得到为:将50μL酿酒酵母ATCC 36859种子液接入装有5mL YEPD(蛋白胨20g/L,酵母膏10g/L,葡萄糖20g/L,pH 6.0,121℃灭菌20min)的大试管中,30℃160r/min培养8h。
[0070] 对比实验8
[0071] 参照实施例1,月见草花粉末不用漆酶处理,改用纤维素酶处理,其它操作同实施例1,测定的红曲霉发酵液中色素浓度为2.91U/mL、桔霉素含量为0.0179mg/mL。
[0072] 上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
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