[0005] 本发明的目的针对现有技术的不足，提供一种以银杏为原料通过打浆和水解制得银杏蛋白粉，再经一、二次酶解后制得银杏多肽的方法，获得了对银杏进行深加工制得银杏糖肽、氨基酸平衡肽和银杏多肽的方法。
[0006] 本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：
[0007] 一种制备银杏蛋白肽的方法，它包括以下工艺步骤：
[0008] （1）原料处理 将脱壳后的银杏果仁放入100℃沸水中漂烫2min后，捞入50-60℃热水中轻搓漂洗脱去内种皮后，用流动水冲洗干净，再迅速浸没于含有0.5%的食盐、0.25%的柠檬酸和0.1%的抗坏血酸水溶液中进行护色，处理30min后捞出，沥干水分；
[0009] （2）银杏粉的制备 将步骤（1）处理好的银杏果仁先放入砂轮磨中加入果仁重量8倍的含有0.3%食盐和0.2%柠檬酸的纯净水进行粗磨，磨成均匀的浆汁后，立即送入胶体磨中进行细磨，细磨15-25min，使磨浆成为均匀的乳状浆液，将细磨过的乳状浆液送入离心过滤机中进行离心过滤，浆渣加2倍量同上条件的纯净水，再送入胶体磨细磨1次，经离心过滤后，再将两次经过过滤的浆液合并，再用300目筛网过滤1次，经干燥后得银杏粉；
[0010] （3）银杏蛋白粉制备 将步骤（2）获得的银杏粉加入纯净水，按重量比为1：20的配料比混合，充分搅拌，用1moL/L氢氧化钠调节PH至6.6-7.2之间，浸泡3h后过滤，取滤液，以0.5moL/L盐酸调节PH4-5之间，煮沸3h，静置沉淀，除去上层泡沫和溶液后，得沉淀物，再将沉淀物，按重量比加入5倍量的纯净水，搅匀，冷至38-45℃时，离心甩干得湿银杏蛋白，经干燥后得银杏蛋白粉；
[0011] （4）一次酶解 将步骤（3）得到的银杏蛋白粉溶解，溶解的条件为银杏蛋白粉在水中的重量浓度为2%、控制温度为50℃、PH值为6.5-6.9进行溶解后，先用中性蛋白酶（SUKAPRO NE）进行酶解，其中条件为中性蛋白酶的重量为银杏蛋白溶液重量的1.5-3%，PH值为6.6-6.8，保温48-52℃，酶解时间为2.5-4小时，得中性蛋白酶酶解液，然后将酶解液再加入复合风味蛋白酶进行酶解，其中条件为：复合风味蛋白酶的重量为银杏蛋白溶液重量的1.5-3%，PH值自然（不需调整）、保温48-52℃，酶解时间为4.5-8.5小时，得酶解液，然后将酶解液以0.5moL/L盐酸调节PH值在3.6-4.6之间，静置使自然冷却后，进行离心分离得上清液和沉淀物；
[0012] （5）二次酶解 将步骤（4）得到的上清液用复混（配）蛋白酶进行第二次酶解，然后加热至95℃灭酶，经浓缩、喷雾干燥得银杏糖肽；将步骤（4）得到的沉淀物用复混（配）蛋白酶进行第二次酶解，然后加热至95℃灭酶，经离心分离取上清液进行喷雾干燥得氨基酸平衡肽；取沉淀物进行真空干燥得银杏多肽。
[0013] 所述步骤（5）中的上清液酶解条件是PH值为6.6-6.8、温度为48-52℃，酶解时间为6.5-8.5小时；酶解时，复混蛋白酶的重量为上清液重量的1.55-2.6%。
[0014] 所述步骤（5）中的沉淀物酶解时的投料重量浓度为1.5-2%；其中酶解条件是温度为48-52℃，酶解时间为7-9小时；酶解时，复混蛋白酶的重量为沉淀物溶解液的重量的0.75-1.56%。
[0015] 所述步骤（5）中的复混蛋白酶，是由中性蛋白酶与复合风味蛋白酶按1：1.5重量份复配混合制得。
[0016] 采用本发明权利要求1的方法获得银杏糖肽产品。
[0017] 采用本发明权利要求1的方法获得氨基酸平衡肽产品。
[0018] 采用本发明权利要求1的方法获得银杏多肽产品。
[0019] 中性蛋白酶（SUKAPRO NE），蛋白酶（Neutrase）是由淀粉液化芽孢杆菌族生产的内蛋白酶制剂，被广泛用于动、植物的蛋白质加工业，以改变蛋白质的水结合能力、乳化能力、发泡能力及其粘度，能将蛋白质水解为低分子蛋白胨、眎、多肽及氨基酸，中性蛋白酶由中性蛋白酶高产菌株--杆菌（BacuiLLus）深层发酵而成，在中性条件下具有较高的活性，能在中性条件下水解植物蛋白质中的缩氨酸键，释放氨基酸或者多肽，中性蛋白酶适用PH范围是6.0-8.0，最适PH值6.8-7.0，温度范围是10℃-60℃，最适温度45-50℃，然而根据本发明对比试验结果表明，结果显示在温度为48-52℃、PH值为6.6-6.8时酶解效果最佳，其发酵液的澄清度最好。
[0020] 复合风味蛋白酶（Flavourzyme）是由米曲霉生产的内蛋白酶和外蛋白酶混合制剂（内蛋白酶为切割多肽键内部的肽键；外蛋白酶则为切割多肽链一端的肽键）再外加一些风味物质复配而成的复合风味蛋白酶，其特点是酶解后期风味优化，去除苦味，改善口感，可以制取风味良好的水解产品，提高产品质量，本产品含有氨肽酶，羧肽酶，通过末端水解多肽，可提高水解度。复合风味蛋白酶最适PH值是6.0-7.0，温度50-53℃，其酶解条件与中性蛋白酶相本相似。
[0021] 根据中性蛋白酶与复合风味蛋白酶的特性，将二者复混配合使用可取得最好的使用效果。
[0022] 本发明的有益效果
[0023] 1.本发明首先通过对银杏果仁进行加工分离处理制得银杏粉，然后将银杏粉采用碱液溶解，再用HCl调节PH值4-5之间煮沸3小时进行水解、分离制得银杏蛋白粉，再将银杏蛋白粉通过中性蛋白酶酶解和复混蛋白酶二次酶解工艺，获得了两种组成不同的银杏糖肽、氨基酸平衡肽和一个混合肽即银杏多肽新产品。
[0024] 2.本发明步骤（5）中采用的复混蛋白酶进行二次酶解工艺，该复混酶是由中性蛋白酶与复合风味蛋白酶按1：1.5的重量分复配混合而成，该工艺使用的好处在于，二种酶的酶解条件相近，可减少工艺的繁杂调整过程，有利于节约原材料、节省时间，提高其稳定性；复合风味蛋白酶是由米曲霉生产的内蛋白酶和外蛋白酶的混合制剂，其内蛋白酶为切割多肽内部的肽键，而外蛋白酶则为切割多肽链一端的肽键，有利多肽的产生，提升银杏酶解过程多肽的含量和提取率，另外复合风味蛋白酶的应用还能改善酶解产物的风味，去除苦味，改善口感，使制得的产品风味良好，有利于提高产品质量。
[0025] 3.本发明方法采取从银杏原料入手开辟银杏多肽制备新工艺，实现了产品概念的内在本质和技术创新，所制得的银杏糖肽、氨基酸平衡肽及银杏多肽性质稳定，不受PH值和加热的影响，本发明利用银杏果实制备的银杏糖肽、氨基酸平衡肽银杏多肽和银杏多肽，开拓了银杏利用新领域，也为开发特殊功能产品提供了新的产品资源。
[0026] 4.本发明的制备技术，工艺独特，工艺简单，生产成本低，产品安全而无毒副作用，是营养和辅助医疗的有前景的原料制品，可作为开发保健食品、食品添加剂和医药原料及辅料的原材料应用。
