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茶源冠突散囊菌菌株及其应用   0    0

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专利申请流程有哪些步骤?
专利申请流程图
申请
申请号:指国家知识产权局受理一件专利申请时给予该专利申请的一个标示号码。唯一性原则。
申请日:提出专利申请之日。
2013-05-23
申请公布
申请公布指发明专利申请经初步审查合格后,自申请日(或优先权日)起18个月期满时的公布或根据申请人的请求提前进行的公布。
申请公布号:专利申请过程中,在尚未取得专利授权之前,国家专利局《专利公报》公开专利时的编号。
申请公布日:申请公开的日期,即在专利公报上予以公开的日期。
2013-10-09
授权
授权指对发明专利申请经实质审查没有发现驳回理由,授予发明专利权;或对实用新型或外观设计专利申请经初步审查没有发现驳回理由,授予实用新型专利权或外观设计专利权。
2014-09-10
预估到期
发明专利权的期限为二十年,实用新型专利权期限为十年,外观设计专利权期限为十五年,均自申请日起计算。专利届满后法律终止保护。
2033-05-23
基本信息
有效性 有效专利 专利类型 发明专利
申请号 CN201310195681.7 申请日 2013-05-23
公开/公告号 CN103275876B 公开/公告日 2014-09-10
授权日 2014-09-10 预估到期日 2033-05-23
申请年 2013年 公开/公告年 2014年
缴费截止日
分类号 C12N1/14A23F3/10C12R1/645 主分类号 C12N1/14
是否联合申请 独立申请 文献类型号 B
独权数量 1 从权数量 5
权利要求数量 6 非专利引证数量 2
引用专利数量 1 被引证专利数量 0
非专利引证 1、刘子音等.茯砖茶中冠突散囊菌及其代谢产物研究进展.《茶叶通讯》.2010,第37卷(第1期),第23-26页.; 2、蔡正安等.茯砖茶中冠突散囊菌纤维素酶的酶学性质研究.《茶叶科学》.2010,第30卷(第1期),第58-59页,图1.;
引用专利 CN102120963A 被引证专利
专利权维持 5 专利申请国编码 CN
专利事件 事务标签 公开、实质审查、授权
申请人信息
申请人 第一申请人
专利权人 湖南农业大学 当前专利权人 湖南农业大学
发明人 李宗军、李珂、许爱清、刘仲华 第一发明人 李宗军
地址 湖南省长沙市芙蓉区东湖湖南农业大学 邮编
申请人数量 1 发明人数量 4
申请人所在省 湖南省 申请人所在市 湖南省长沙市
代理人信息
代理机构
专利代理机构是经省专利管理局审核,国家知识产权局批准设立,可以接受委托人的委托,在委托权限范围内以委托人的名义办理专利申请或其他专利事务的服务机构。
长沙正奇专利事务所有限责任公司 代理人
专利代理师是代理他人进行专利申请和办理其他专利事务,取得一定资格的人。
何为、袁颖华
摘要
本发明公开了一株茶源冠突散囊菌菌株,命名为冠突散囊菌(Eurotium cristatum)XU08,已于2012年3月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC No.5891。通过对该菌株的形态特征、生理特性、遗传稳定性以及在茯砖茶生产过程中的生长条件进行研究,并对其进行工业化中试生产应用,显示该菌株可作为茯砖茶生产的专用发酵剂,可以缩短生产周期,提高产品品质,非常适合现代化茯砖茶生产需要。
  • 摘要附图
    茶源冠突散囊菌菌株及其应用
法律状态
序号 法律状态公告日 法律状态 法律状态信息
1 2014-09-10 授权
2 2013-10-09 实质审查的生效 IPC(主分类): C12N 1/14 专利申请号: 201310195681.7 申请日: 2013.05.23
3 2013-09-04 公开
权利要求
权利要求书是申请文件最核心的部分,是申请人向国家申请保护他的发明创造及划定保护范围的文件。
1.一株茶源冠突散囊菌菌株,其特征在于,该菌株命名为冠突散囊菌(Eurotium cristatum)XU08,已于2012年3月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC No.5891。

2.一种发酵法制备茯砖茶生产发酵用发酵液的方法,其特征在于,所用菌株为权利要求1所述的冠突散囊菌XU08,培养基为M40Y液体培养基,发酵条件:接种量为100mLM40Y液体培养基添加0.2-3g冠突散囊菌XU08,培养时间5-14天,温度为24-30℃,搅拌速度为
50-200r/min。

3.一种发酵法制备茯砖茶生产发酵用发酵剂的方法,其特征在于,所用菌株为权利要求1所述的冠突散囊菌XU08,培养基为固体发酵培养基,发酵条件:接种量为100g固体发酵培养基添加0.2-1g冠突散囊菌XU08,温度为24-30℃,培养时间为3-7天;
上述固体发酵培养基按质量比含有20%茶叶末、20%麸皮、0.5%麦芽膏、0.5%酵母膏、9%蔗糖及50%水。

4.如权利要求1所述的菌株在茯砖茶生产发酵中的应用。

5.如权利要求2所述方法制备的发酵液在茯砖茶生产发酵中的应用。

6.如权利要求3所述方法制备的发酵剂在茯砖茶生产发酵中的应用。
说明书

技术领域

[0001] 本发明属于微生物应用与食品加工工艺领域,具体涉及一株茶源冠突散囊菌菌株及其在茯砖茶生产发酵中的应用。技术背景
[0002] 茯砖茶属于完全发酵茶,是所有茶类中加工工艺最复杂,最独特的黑茶类产品。在茯砖茶成品的茶叶表面普遍存在俗称“金花”的金黄色小点,这是茯砖茶区别于其它砖茶的重要特征。“金花”是茯砖茶中的冠突散囊菌产生的金黄色闭囊壳,“金花”的多少是茯砖茶品质好坏的重要指标。
[0003] 冠突散囊菌能产生各种胞外酶(如多酚氧化酶、果胶酶、纤维素酶、蛋白酶等),作为有效的生化动力,催化茶叶中各种相关物质发生氧化、聚合、降解、转化,改善茯砖茶的品质,形成茯砖茶特有的风味。自然发酵生产茯砖茶过程中,生产周期一般较长,且发酵前期容易产生多种杂菌,造成茯砖茶品质不稳定,严重时可造成茯砖茶霉变报废。

发明内容

[0004] 本发明所要解决的技术问题是:针对上述现有技术的不足,提供一种冠突散囊菌(Eurotium cristatum)XU08,可作为茯砖茶生产发酵时使用。
[0005] 本发明的冠突散囊菌(Eurotium cristatum)XU08,已于2012年3月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC No.5891,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
[0006] 本发明菌株XU08具有的性质如下:
[0007] 在M40Y固体培养基上25℃培养7天,可形成直径大于85 mm的菌落,且在38℃也能生长。菌落周边有一圈白色至浅黄色菌丝体,内部近于橄榄浅黄色,中央部分颜色较深,近于褐色,14天后中央部分变成棕色,又内向外颜色逐渐变浅,表面形成大量闭黄色囊壳。菌落反面深棕黄色,色素扩散至基质中。用显微镜观察可见闭囊壳表面粗糙,有明显冠状突起,具小疣的子囊孢子和具小刺的分生孢子;闭囊壳被具饰菌丝包缠,形状为球形或近似球形;子囊孢子具有两个明显的冠状突起,呈双凸镜形,孢子体凸面明显粗糙,具小疣。
[0008] 本发明菌株XU08属于好气性菌,耐干燥耐高渗透压,最适PH为5.2,能在pH3-pH6的酸性环境中生长,最适生长温度为24~30℃,最高生长温度为38℃。能利用多种氮源、碳源,利用双糖或多糖能力不如利用单糖能力强,在双糖和多糖中只能利用麦芽糖和蔗糖。
[0009] 本发明菌株在形态学上的特征,与菌物鉴定手册中冠突散囊菌(Eurotium cristatum)的描述特征一致,并通过对其DNA测序后可以确定本发明菌株本发明菌株为冠突散囊菌(Eurotium cristatum)的一个新种,命名为冠突散囊菌(Eurotium cristatum)XU08。
[0010] 将M40Y斜面培养基上活化的本发明菌株XU08的菌体及包子收集后,按100mL培养基添加0.2-3g菌体及包子的接种量,将本发明菌株XU08的菌体及包子接种在M40Y液体培养基(M40Y液体培养基:蔗糖400g、麦芽膏20g、琼脂20g、酵母膏5.0g、水1000mL、pH自然、121℃灭菌20min)中,在24-30℃、搅拌速度为50-200r/min条件下发酵培养5-14天,制得的发酵液可用于茯砖茶的发酵生产工艺中,具体为:在茯砖茶原料经过汽蒸之后,压砖成型前,按1kg汽蒸后的茯砖茶原料添加5-50mL发酵液的比例,于汽蒸后的茯砖茶原料中加入该发酵液,之后再进行压砖成型,成型后按一般茯砖茶生产工艺开展后续生产。
[0011] 将M40Y斜面培养基上活化的本发明菌株XU08的菌体及包子收集后,按100g培养基添加0.2-1g菌体及包子的接种量,将本发明菌株XU08的菌体及包子接种在固体发酵培养基中,在24-30℃培养3-7天,制得的发酵剂可用于茯砖茶的发酵生产工艺中,具体为:在茯砖茶原料经过汽蒸之后、压砖成型前,按1kg汽蒸后的茯砖茶原料添加2-40g固体发酵剂的比例,于汽蒸后的茯砖茶原料中加入该固体发酵剂,拌匀之后再进行压砖成型,成型后按一般茯砖茶生产工艺开展后续生产。
[0012] 如生产需要的固体发酵剂量大,也可利用第1次制备的固体发酵剂再进行1-2次扩大培养,添加量为100g固体发酵培养基添加2-5g第1次制备的固体发酵剂,拌匀后,在温度为24-30℃,培养3-7天。
[0013] 上述提及的固体发酵培养基按质量比含有20%茶叶末、20%麸皮、0.5%麦芽膏、0.5%酵母膏、9%蔗糖及50%水,是将茶叶末、麸皮、麦芽膏、酵母膏及蔗糖按质量比40:40:
1:1:18混合后,加入等质量(茶叶末、麸皮、麦芽膏、酵母膏及蔗糖的总质量)的水拌匀,
121℃,20min灭菌制得。
[0014] 由于汽蒸后茯砖茶原料中大多数微生物被杀灭或受到抑制,此时加入菌株XU08制备的发酵液或固体发酵剂,利于该菌迅速在压制的砖茶中生长发花,尽可能地避免了后续发酵过程中杂菌的污染与生长,同时,本发明菌株XU08在茯砖茶上生长,可向外分泌大量的胞外酶,如多酚氧化酶、果胶酶、纤维素酶、蛋白酶等,将茯砖茶中的物质降解成分子量较小的化合物,在此过程中发生的氧化、聚合、降解、转化等作用可改善茯砖茶的加工品质,利于形成浓郁的茯砖茶特有的风味,产品稳定性提高。

实施方案

[0015] 实施例1 本发明菌株的制备
[0016] 从湖南岳阳地区采集茶树的一芽四五叶成熟新梢,在制作茯砖茶过程中,压砖成型后自然发花3天时,称取25g, 置于盛有225 mL灭菌0.1%蛋白胨水的三角瓶中,充分振荡5min,10倍系列稀释后,取三个稀释度的菌悬液各0.1mL涂布于M40Y培养基平板,25℃培养7d,观察菌落形态,取单菌落划线分离纯化,得本发明菌株XU08。
[0017] 实施例2 本发明菌株XU08发酵液的制备
[0018] 将M40Y斜面培养基上活化的本发明菌株XU08的菌体及包子收集后接种到M40Y液体培养基中培养,接种量为每100mL M40Y液体培养基添加1g菌体及包子,培养温度为26℃,搅拌速度为80r/min,培养时间10天。
[0019] 实施例3 本发明菌株XU08固体发酵剂的制备
[0020] 将M40Y斜面培养基上活化的本发明菌株XU08的菌体及包子收集后,接种至固体发酵培养基中,接种量为每100g培养基添加0.5克菌体及包子,拌匀后,于27℃培养5天。
[0021] 实施例4 本发明菌株XU08固体发酵剂的制备
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