烟曲霉SQH4及在生物转化法制备花旗松素中的应用   0    0

本发明公开了一种烟曲霉SQH4及在生物转化法制备花旗松素中的应用，以落新妇苷为底物，烟曲霉SQH4发酵制备发酵液为催化剂，在底物投料浓度为3g/L时，花旗松素的转化得率为92.3％。本发明的技术优势有：相比于从植物中提取花旗松素，解决了生产原料紧缺的问题；相比于酸水解落新妇苷法，具有转化专一性好，产物得率高的优点。本发明是一种可选的花旗松素生产方法，工艺具有生产成本低、转化率高、环境污染小等优点。

1.一种烟曲霉（Aspergillus fumigatus）SQH4，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：GDMCC No: 60239，保藏日期2017年9月15日，地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；邮编：510075。

2.一种权利要求1所述烟曲霉SQH4在生物转化落新妇苷制备花旗松素中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的应用为：以烟曲霉SQH4经发酵培养后的发酵液或发酵液离心收集的湿菌体用pH6.0 6.5磷酸缓冲液悬浮制成的菌悬液为生物催化~
剂和反应介质，以落新妇苷为底物，以甲醇为助溶剂构成转化体系，于30～35℃、200～250 r/min恒温振荡条件下进行转化反应，转化反应结束后，转化液经分离获得花旗松素。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述转化体系中湿菌体用量以干重计为3～4 g/L。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述转化体系中所述底物落新妇苷的终浓度为0.01～3 g/L，所述甲醇的体积终浓度为0.1%～1%。

6.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述发酵液按如下方法制备：将烟曲霉SQH4接种至发酵培养基，于28～30℃、200～250 r/min恒温振荡条件下培养2～3 d，获得发酵液；
所述发酵培养基终浓度组成为：蔗糖10～20 g/L，蛋白胨5～8 g/L，酵母粉3～5 g/L，KH2PO4 
5 g/L，NaCl 5 g/L，MgSO4·7H2O 1 g/L，MnSO4·H2O 1 g/L，溶剂为自来水，初始pH 6.0～
7.0。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述烟曲霉SQH4发酵培养方法为：
（1）活化培养：将烟曲霉SQH4接种于PDA平板培养基，于28～30℃恒温培养2～3 d，获得烟曲霉SQH4孢子；所述的PDA平板培养基终浓度组成为：马铃薯200 g/L，葡萄糖20 g/L，琼脂20 g/L，溶剂为自来水，pH自然；
（2）种子扩大培养：挑取步骤（1）活化培养后烟曲霉SQH4孢子接种至种子培养基中，于
28～30℃、200～250 r/min恒温振荡条件下培养2～3 d，得种子液；所述种子培养基组成为：蔗糖10 g/L，蛋白胨5 g/L，酵母粉3 g/L，KH2PO4 5 g/L，NaCl 5 g/L，MgSO4·7H2O 1 g/L，MnSO4·H2O 1 g/L，溶剂为自来水，初始pH 6.5；
（3）发酵培养：用步骤（1）活化培养后烟曲霉SQH4孢子，或步骤（2）制备的种子液按体积浓度3%～6%的接种量接入发酵培养基，于28～30℃、200～250 r/min恒温振荡条件下培养2～3 d，获得发酵液；所述发酵培养基终浓度组成为：蔗糖10～20 g/L，蛋白胨5～8 g/L，酵母粉3～5 g/L，KH2PO4 5 g/L，NaCl 5 g/L，MgSO4·7H2O 1 g/L，MnSO4·H2O 1 g/L，溶剂为自来水，初始pH 6.0～7.0。

8.如权利要求6或7所述的应用，其特征在于所述发酵培养基终浓度组成为：蔗糖20 g/L，蛋白胨8 g/L，酵母粉5 g/L，KH2PO4 5 g/L，NaCl 5 g/L，MgSO4·7H2O 1 g/L，MnSO4·H2O 
1 g/L，溶剂为自来水，初始pH 6.0。