[0026] 以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
[0027] 实施例1特基拉芽孢杆菌JN369的分离获得
[0028] 从湖南省桃江石牛江镇花田村(N28°42′55.56″，E112°15′74.24″)感稻瘟病水稻品种湘早籼24号的病丛中选取健康稻株，共分离出517株菌株，采用与稻瘟病菌平板对峙法筛选出1株对稻瘟病菌(M.oryzae)菌丝抑制率达79.95％的拮抗菌JN369。
[0029] 通过在NA固体培养基(蛋白胨5g/L，牛肉浸膏3g/L，葡萄糖20g/L，琼脂17g/L，pH 7.0，蒸馏水配制)平板上培养菌株JN369(图2A和图2B)，对其菌落形态进行观察，对其菌体的扫描电镜图观察，并结合该菌的生理生化、微生物学检测结果，以及16S rDNA测序结果(见SEQ ID NO.1)，最终确定菌株JN369为特基拉芽孢杆菌(B.tequilensis)。
[0030] 此外，采用平板对峙培养法发现菌株JN369对多种病原指示菌具有抑制效果(图3)，例如烟草赤星病菌(A.alternata)、棉花枯萎病菌(F.oxysporum)、辣椒胶孢炭疽(C.gloeosporioides)、黄瓜疫病(P.melonis)生长的抑菌率分别为69.31％、35.80％、
70.83％和51.32％。
[0031] 实施例2特基拉芽孢杆菌JN369在水稻稻瘟病防治中的应用
[0032] 菌株JN369在NA固体培养基平板上活化后，用打孔器打取直径5mm的2个菌饼接入装有150mL NB液体培养基(蛋白胨5g/L，牛肉浸膏3g/L，葡萄糖20g/L，pH 7.0，蒸馏水配制)的250mL三角瓶中，28℃、180r/min条件在摇床中振荡培养6d，用细菌过滤器过滤，获得特基拉芽孢杆菌JN369代谢产物。
[0033] 将菌株JN369代谢产物和PDA培养基以体积(mL)1:8的量混匀，接直径为7mm的稻瘟病菌菌饼于配好的培养基上，以无菌水代替拮抗菌培养液为对照，28℃培养，10d后测量稻瘟病菌的菌饼的大小，3次重复，结果显示对稻瘟病菌菌丝的抑制率为79.95％。
[0034] 温室盆栽试验包括JN369菌株不同浓度活体菌和代谢产物对水稻高感稻瘟病品种湘晚籼12号的稻瘟病防治效果试验两部分，试验在组培控温光照培养室内进行。
[0035] JN369活体菌对水稻高感品种湘晚籼12号的稻瘟病防治效果：采用喷雾法接种稻瘟病菌(分生孢子浓度为1×105个/mL)诱发稻瘟病。将JN369活菌浓度梯度设计为：1×1010cfu/mL、1×109cfu/mL、1×108cfu/mL、1×107cfu/mL共4个浓度梯度。试验包括3种处理方式，分别为：A组先喷稻瘟病菌孢子液，第3d喷4个浓度梯度的JN369菌株活菌液；B组接种稻瘟病菌孢子悬浮液前1d分别喷4个浓度梯度的JN369菌株活菌液；C组接种稻瘟病菌孢子液前3d先分别喷4个浓度梯度的JN369菌株活菌液；设置清水、20％三环唑WP(×400倍液)和
40％稻瘟灵EC(×500倍液)为对照，每种处理方式3钵，每钵30株。接种后7-10d对稻瘟病抗性进行分级调查和防治稻瘟病效果评价。
[0036] JN369菌株代谢产物对水稻高感品种湘晚籼12号的稻瘟病防治效果评价：采用水稻活体接种法接种稻瘟病菌分生孢子悬浮液(浓度为1×105个/mL)诱发稻瘟病。具体试验包括3种处理方式，分别为：A组先喷稻瘟病菌孢子液，第3d喷代谢产物；B组先喷代谢产物，1d后喷稻瘟病菌孢子液；C组先喷代谢产物，3d后喷稻瘟病菌孢子液。设置清水、杀菌剂40％稻瘟灵EC(×500倍液)和20％三环唑WP(×400倍液)为对照，每种处理方式3钵，每钵30株。
接种后7-10d对稻瘟病抗性进行分级调查和防治效果评价。
[0037] 温室盆栽试验结果：JN369活体菌对水稻高感品种湘晚籼12号的稻瘟病防治效果见表1，JN369菌株代谢产物对水稻高感品种湘晚籼12号的稻瘟病防治效果见表2。
[0038] 表1 JN369活体菌对湘晚籼12号的稻瘟病治疗效果
[0039]处理及菌体浓度(cfu/ml) 病株率(％) 病情指数 相对防效(％)
1×107(A组) 64.44 18.02 71.81
1×108(A组) 44.44 8.88 86.10
1×109(A组) 43.33 10.24 83.97
1×1010(A组) 66.67 15.30 76.06
40％稻瘟灵(A组) 85.55 29.87 53.28
三环唑(A组) 85.55 36.42 43.05
清水(A组) 97.78 63.95 /
1×107(B组) 83.33 38.90 39.89
1×108(B组) 62.22 20.74 67.94
1×109(B组) 60.00 19.01 70.61
10
1×10 (B组) 84.44 40.86 36.83
40％稻瘟灵(B组) 91.11 42.10 34.92
20％三环唑(B组) 81.11 37.41 42.18
清水(B组) 100.00 64.69 /
7
1×10(C组) 67.78 29.63 54.20
1×108(C组) 66.67 24.32 62.40
1×109(C组) 61.11 18.80 70.80
1×1010(C组) 74.44 33.33 48.47
40％稻瘟灵(C组) 86.67 39.88 38.36
20％三环唑(C组) 87.78 40.74 37.02
清水(C组) 100.00 64.69 /
[0040] 注：以上数据均为3次重复结果。
[0041] 表2 JN369菌株代谢产物对湘晚籼12号的稻瘟病防治效果
[0042]处理 病株率(％) 病情指数 相对防效(％)
JN369(A组) 45.55 8.52 86.67
40％稻瘟灵(A组) 85.55 29.87 53.28
三环唑(A组) 85.55 36.42 43.05
清水(A组) 97.78 63.95 /
JN369(B组) 84.44 37.90 41.41
40％稻瘟灵(B组) 91.11 42.10 34.92
20％三环唑(B组) 81.11 37.41 42.18
清水(B组) 100.00 64.69 /
JN369(C组) 76.67 27.90 56.87
40％稻瘟灵(C组) 86.67 39.88 38.36
20％三环唑(C组) 87.78 40.74 37.02
清水(C组) 100.00 64.69 /
[0043] 注：以上数据均为3次重复结果。
[0044] 虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
