[0018] 实施例1
[0019] 中间体IIa的制备
[0020] N2下，取二氢杨梅素200mg (0.62 mmol)，溶于7mL无水DMF溶液中，加入无水552mg (2.5 mmol) K2CO3，缓慢加入383mg (2.7 mmol)碘甲烷，40℃反应24h，停止反应，加1mL醋酸，过滤，减压蒸干，回收溶剂，硅胶柱层析纯化（V石油醚：V乙酸乙酯 = 6:1），得到7,3’,4’,5’-四甲氧基二氢杨梅素中间体（IIa）。收率26.2%。
[0021] 中间体IIb的制备：
[0022] N2下，取二氢杨梅素200mg (0.62 mmol)，溶于7mL无水DMF溶液中，加入无水690mg (3.1 mmol) K2CO3，缓慢加入710mg (3.1 mmol)碘甲烷，40℃反应24h，停止反应，加1mL醋酸，过滤，减压蒸干，回收溶剂，硅胶柱层析纯化（V石油醚：V乙酸乙酯 = 6:1），得到3,7,3’,4’,5’-五甲氧基二氢杨梅素中间体（IIb）。收率27.0%。
[0023] 中间体IIc的制备：
[0024] N2下，取二氢杨梅素200mg (0.62 mmol)，溶于7mL无水DMF溶液中，加入无水828mg (3.8 mmol) K2CO3，缓慢加入852mg (3.8 mmol)碘甲烷，其它操作同上，得到3,7,9,3’,4’,5’-六甲氧基二氢杨梅素中间体（IIc）。收率36.2%。
[0025] 中间体IId的制备：
[0026] N2下，取二氢杨梅素200mg (0.62 mmol)，加入5mL醋酐中，超声下混匀，避光放置2天，倒入冰水中研磨，过滤，干燥，乙酸乙酯-乙醇重结晶，得到3,7,3’,4’,5’-五乙酰基二氢杨梅素中间体（IId），收率73%，m.p. 163-165℃。
[0027] 中间体IIe的制备：
[0028] N2下，取二氢杨梅素200mg (0.62 mmol)，加入5mL醋酐中，超声下混匀，避光放置2天，倒入冰水中研磨，过滤，干燥，乙酸乙酯-乙醇重结晶，得到3,5，7,3’,4’,5’-六乙酰基二氢杨梅素中间体（IIe），收率68%，m.p. 173-175℃。
[0029] 中间体IIf的制备：
[0030] N2保护下，将320 mg (1.0 mmol)二氢杨梅素溶于5mLDMF中，加入5滴吡啶和112 mg (1.1 mmol)Ac2O，室温反应10h，减压蒸除溶剂，柱层析纯化（V氯仿：V乙醇= 6:1,4:1,2:1梯度淋洗），得7-乙酰基二氢杨梅素。
[0031] N2保护下，将362 mg (1.0 mmol)7-乙酰基二氢杨梅素溶于5mLDMF中，加入625 mg (4.4 mmol)MeI 和607mg (4.4 mmol)K2CO3, 室温反应过夜，过滤，加入10mL浓度为30%的乙二胺甲醇溶液，40℃反应8h，减压蒸干，柱层析纯化（V氯仿：V乙醇= 6:1,4:1,2:1梯度淋洗），得3,3’,4’,5’-四甲氧基二氢杨梅素（中间体IIf）,收率33%。
[0032] 中间体IIg的制备：
[0033] N2保护下，称取1.6g（5mmol）二氢杨梅素（含量98%)置于50mL的三角瓶中，然后依次加入15ml醋酸酐和1.2g硼酸，混匀，避光放置3天，倒入冰水中研磨，有黄色硼酸络合物析出，过滤，将所得黄色固体物加入40mL含有10%的HC1溶液，于60℃反应30min，除去硼酸，有黄白色固体生成，过滤，用水淋洗至中性，收集固体，干燥后即得粗品。用EtOH重结晶，得白色晶体，即二氢杨梅素四乙酰化产物(中间体IIg)，产率89%。m.p.205-206℃。
[0034] 实施例2
[0035] 中间体IIIa-g和8-硝基二氢杨梅素的制备:
[0036] N2下，分别将0.2mL70%HNO3与10mL醋酸混合，65℃分别滴加0.5mmol中间体IIa-g/250mL醋酸的溶液，滴毕，反应2h，冷却，反应液倒入200mL冰水中，搅拌，析出固体，过滤，水洗，乙醇重结晶，分别得到IIIa，收率70%；IIIb，收率76%；IIIc，收率77%；IIId，收率79%；
IIIe，收率81%；IIIf，收率78%；IIIg，收率71%。
[0037] 用0.5mmol二氢杨梅素代替0.5mmol中间体IIa-g，其它操作不变，得到8-硝基二氢杨梅素，收率67%。
[0038] 实施例3
[0039] 中间体IVa-g和8-氨基二氢杨梅素的制备:
[0040] 高压釜中，分别将0.5mmol的IIIa-g加入到100mL乙醇中，分别加入30mg10%的Pd-C，用N2置换空气后，通入H2，80℃反应2h，冷却，过滤，旋蒸出乙醇，硅胶柱层析纯化，分别得到IVa，收率87%；IVa，收率87%；IVb，收率89%；IVc，收率89%；IVd，收率90%；IVe，收率91%；IVf，收率87%；IVg，收率89%。
[0041] 用0.5mmol8-硝基二氢杨梅素代替0.5mmol中间体IIIa-g，其它操作不变，得到8-氨基二氢杨梅素，收率92%。
[0042] 实施例4
[0043] 中间体Va-g和8-（3-羟基丙氨基）二氢杨梅素的制备:
[0044] N2下，分别将0.5mmol的IVa-g溶于50mL丙酮，分别加入56.4mg(0.6mmol)的3-氯丙醇和82.8mg(0.6mmol)的K2CO3，回流反应7h，冷却，过滤，蒸除溶剂，硅胶柱层析纯化，分别得到Va，收率67%；Vb，收率71%；Vc，收率69%；Vd，收率72%；Ve，收率67%；Vf，收率65%；Vg，收率69%。
[0045] 用0.5mmol的8-氨基二氢杨梅素代替0.5mmol的IVa-g，得到8-（3-羟基丙氨基）二氢杨梅素，收率70%。
[0046] 实施例5
[0047] 化合物（1-8）的制备:
[0048] N2下，分别将0.5mmol的Va-g或8-（3-羟基丙氨基）二氢杨梅素溶于50mL丙酮，冷却至0℃，分别加入141mg(0.55mmol)氮芥磷酰二氯和111mg(1.1mmol)Et3N，自然升至室温，反应8小时，过滤，滤液浓缩，柱层析纯化，分别得化合物（1-8）。
[0049] 化合物（1）：收率80%；ESI-MS (m/z): 578 [M]+；1H NMR（300MHz，DMSO-d6）δ 1.86 (m, 2H), 3.15 (m, 2H), 3.34 (m, 4H), 3.68 (m, 4H),4.42 (d, J = 11Hz, 1H), 4.45 (m, 2H),4.93 (d, J = 11Hz, 1H), 5.57 (s, 1H),5.87 (s, 1H), 7.40 (s, 2H),
8.19 (s, 1H), 8.90 (s, 2H), 10.07 (s, 1H), 11.85 (s, 1H)。
[0050] 化合物（2）：收率84%；ESI-MS (m/z): 634 [M]+；1H NMR（300MHz，DMSO-d6）δ 1.85 (m, 2H), 3.16 (m, 2H), 3.34 (m, 4H), 3.68 (m, 4H), 3.91 (s, 9H), 3.94 (s, 3H),4.42 (d, J = 11Hz, 1H), 4.45 (m, 2H),4.93 (d, J = 11Hz, 1H), 5.56 (s,
1H),5.86 (s, 1H), 7.40 (s, 2H), 11.85 (s, 1H)。
[0051] 化合物（3）：收率83%；ESI-MS (m/z): 648 [M]+；1H NMR（300MHz，DMSO-d6）δ 1.86 (m, 2H), 3.15 (m, 2H), 3.35 (m, 4H), 3.44 (s, 3H), 3.68 (m, 4H), 3.91 (s, 9H), 3.94 (s, 3H),4.42 (d, J = 11Hz, 1H), 4.45 (m, 2H),4.93 (d, J = 11Hz,
1H), 5.86 (s, 1H), 7.40 (s, 2H), 11.85 (s, 1H)。
[0052] 化合物（4）：收率81%；ESI-MS (m/z): 662 [M]+；1H NMR（300MHz，DMSO-d6）δ 1.86 (m, 2H), 3.16 (m, 2H), 3.35 (m, 4H), 3.44 (s, 3H), 3.68 (m, 4H), 3.91 (s, 12H), 3.94 (s, 3H),4.42 (d, J = 11Hz, 1H), 4.45 (m, 2H),4.93 (d, J = 11Hz,
1H), 5.86 (s, 1H), 7.40 (s, 2H)。
[0053] 化合物（5）：收率81%；ESI-MS (m/z): 788 [M]+；1H NMR（300MHz，DMSO-d6）δ 1.85 (m, 2H), 2.28 (s, 6H), 2.30 (s, 6H), 2.35 (s, 3H), 3.15 (m, 2H), 3.35 (m, 4H), 3.68 (m, 4H), 5.82 (m, 1H), 4.45 (m, 2H),5.93 (m, 1H), 6.96 (s, 1H),
7.40 (s, 2H), 11.37 (s, 1H)。
[0054] 化合物（6）：收率85%；ESI-MS (m/z): 830 [M]+；1H NMR（300MHz，DMSO-d6）δ 1.85 (m, 2H), 2.28 (s, 6H), 2.30 (s, 6H), 2.35 (s, 6H), 3.15 (m, 2H), 3.35 (m, 4H), 3.68 (m, 4H), 5.82 (m, 1H), 4.45 (m, 2H),5.93 (m, 1H), 6.96 (s, 1H),
7.40 (s, 2H)。
[0055] 化合物（7）：收率77%；ESI-MS (m/z): 634 [M]+；1H NMR（300MHz，DMSO-d6）δ 1.86 (m, 2H), 3.16 (m, 2H), 3.35 (m, 4H), 3.44 (s, 3H), 3.68 (m, 4H), 3.91 (s, 6H), 3.94 (s, 3H),4.42 (d, J = 11Hz, 1H), 4.45 (m, 2H),4.93 (d, J = 11Hz,
1H), 5.86 (s, 1H), 7.40 (s, 2H), 10.02 (s, 1H) 11.85 (s, 1H)。
[0056] 化合物（8）：收率76%；ESI-MS (m/z): 746 [M]+；1H NMR（300MHz，DMSO-d6）δ 1.85 (m, 2H), 2.28 (s, 6H), 2.30 (s, 6H), 3.15 (m, 2H), 3.35 (m, 4H), 3.68 (m, 4H), 5.82 (m, 1H), 4.45 (m, 2H),5.93 (m, 1H), 6.96 (s, 1H), 7.40 (s, 2H),
10.01 (s, 1H) 11.85 (s, 1H)。
[0057] 实施例6
[0058] 分别将1mmol化合物（1-8）加入含水丙酮溶液中，搅拌2h，过滤，干燥，分别得到化合物（1-8）的一水合物。
[0059] 实施例7
[0060] 二氢杨梅素环磷酰胺衍生物抗肿瘤活性研究
[0061] 化合物体外抗肿瘤活性用IC50值评定：将细胞按一定密度接种于含10体积% 小牛血清的RPMI1640培养基（内含适量青霉素、链霉素和谷氨酰胺）的96孔板中，5wt%CO2，37℃条件下培养24小时后，换用不同浓度授试药物（用PBS配制成1μg/mL工作液，使用时按需要用培养基稀释）的新鲜培养基，不同稀释浓度的阳性对照药5-氟尿嘧啶药液为阳性对照，每组设6个平行孔，继续培养48小时。取出96孔培养板，每孔加入20μL 5mg/mL的MTT，继续培养4小时。取出培养板，倒出培养基，每孔加入200μL DMSO，平板摇床震摇5分钟，待结晶溶解后，置酶联检测仪，于570nm波长下测定各孔的OD值。用Bliss法求出半数抑制浓度IC50。
[0062] 二氢杨梅素环磷酰胺衍生物对HL60（白血病细胞）、MCF-7（人乳腺癌）、HeLa（人宫颈癌）、SGC-803（胃癌）和HepG2（肝癌）肿瘤细胞株的抑制活性如表1所示。结果显示，二氢杨梅素环磷酰胺衍生物具有好的抗癌活性。
[0063]
