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一种捕蝇草组织培养育苗方法   0    0

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专利申请流程有哪些步骤?
专利申请流程图
申请
申请号:指国家知识产权局受理一件专利申请时给予该专利申请的一个标示号码。唯一性原则。
申请日:提出专利申请之日。
2016-12-15
申请公布
申请公布指发明专利申请经初步审查合格后,自申请日(或优先权日)起18个月期满时的公布或根据申请人的请求提前进行的公布。
申请公布号:专利申请过程中,在尚未取得专利授权之前,国家专利局《专利公报》公开专利时的编号。
申请公布日:申请公开的日期,即在专利公报上予以公开的日期。
2017-06-23
授权
授权指对发明专利申请经实质审查没有发现驳回理由,授予发明专利权;或对实用新型或外观设计专利申请经初步审查没有发现驳回理由,授予实用新型专利权或外观设计专利权。
2018-10-02
预估到期
发明专利权的期限为二十年,实用新型专利权期限为十年,外观设计专利权期限为十五年,均自申请日起计算。专利届满后法律终止保护。
2036-12-15
基本信息
有效性 有效专利 专利类型 发明专利
申请号 CN201611157501.6 申请日 2016-12-15
公开/公告号 CN106718905B 公开/公告日 2018-10-02
授权日 2018-10-02 预估到期日 2036-12-15
申请年 2016年 公开/公告年 2018年
缴费截止日
分类号 A01H4/00 主分类号 A01H4/00
是否联合申请 独立申请 文献类型号 B
独权数量 1 从权数量 4
权利要求数量 5 非专利引证数量 1
引用专利数量 0 被引证专利数量 0
非专利引证 1、于金平等.捕蝇草组织培养与快速繁殖研究《.江苏农业科学》.2008,(第1期),;
引用专利 被引证专利
专利权维持 4 专利申请国编码 CN
专利事件 转让 事务标签 公开、实质审查、授权、权利转移
申请人信息
申请人 第一申请人
专利权人 六盘水黔丰农业发展有限公司 当前专利权人 江苏知聚知识产权服务有限公司
发明人 曹强、周明辉、任广标、蔡凤相、刘芳 第一发明人 曹强
地址 贵州省六盘水市水城县双水祥和人家7号楼 邮编 553000
申请人数量 1 发明人数量 5
申请人所在省 贵州省 申请人所在市 贵州省六盘水市
代理人信息
代理机构
专利代理机构是经省专利管理局审核,国家知识产权局批准设立,可以接受委托人的委托,在委托权限范围内以委托人的名义办理专利申请或其他专利事务的服务机构。
贵阳中新专利商标事务所 代理人
专利代理师是代理他人进行专利申请和办理其他专利事务,取得一定资格的人。
张行超
摘要
本发明公开了一种捕蝇草组织培养育苗方法,包括以下步骤:(1)培养基制备、(2)外植体制备、(3)诱导培养、(4)生根培养以及(5)套袋驯化。本发明解决了传统播种繁殖、叶插繁殖成功率极低、繁殖效率缓慢等问题,运用采用本发明所述的方法进行捕蝇草组织培养育苗,培养基繁殖系数达到4~5,繁殖一批仅需4~6个月的时间,具有繁殖系数高、繁殖速度快的特点,而且繁育出来的种苗具有与母体相同的植物特征,抗性好。大大解决了捕蝇草繁殖困难的问题,有利于捕蝇草进行规模化、工厂化生产。
  • 摘要附图
    一种捕蝇草组织培养育苗方法
法律状态
序号 法律状态公告日 法律状态 法律状态信息
1 2021-03-16 专利权的转移 登记生效日: 2021.03.03 专利权人由泗洪县庄联建筑科技有限公司变更为江苏知聚知识产权服务有限公司 地址由223900 江苏省宿迁市泗洪县东方明珠2#-15-1变更为211111 江苏省南京市江宁区秣陵街道秣周东路12号
2 2018-10-02 授权
3 2017-06-23 实质审查的生效 IPC(主分类): A01H 4/00 专利申请号: 201611157501.6 申请日: 2016.12.15
4 2017-05-31 公开
权利要求
权利要求书是申请文件最核心的部分,是申请人向国家申请保护他的发明创造及划定保护范围的文件。
1.一种捕蝇草组织培养育苗方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)培养基制备:培养基包括诱导增殖培养基和生根培养基,诱导增殖培养基为2/3MS+
6-BA
0. 1mg/L+IBA0.2mg/ml+蔗糖30g/L+琼脂5g/L+ph5.9;生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.2g/L+琼脂5g/L+pH5  .9;将配制好的诱导增殖培养基和生根培养基分别以每瓶80ml装入培养瓶中,采用121℃、0.5MPa进行灭菌25min后冷却凝固备用;
(2)外植体制备:在春夏季节,选用成熟健壮4年以上的捕蝇草作为外植体母体,取新发出且鲜绿的芽头作为外植体,并进行消毒、清洗;
(3)诱导培养:接种器具进行灭菌,双手消毒后,将步骤(2)中制备得到的外植体放 在超净工作台内,按无菌操作要求把外植体置于步骤(1)制备得到的诱导增殖培养基中,外植体伤口处接触到诱导增殖培养基,盖好培养瓶盖后放置于消毒后的培养室内进行培养30天,即可诱导培养出完整小植株;
(4)生根培养:将诱导培养得到的完整小植株在超净工作台内按无菌要求转接入步骤(1)制备得到的生根培养基中进行生根培养2 3个月;
~
(5)套袋驯化:将生根培养得到幼苗取出,用1000倍多菌灵浸泡10min后流水冲洗后种植于泥炭土与珍珠岩混合基质中,用透光的袋子罩住整株植株,放置在散光通风处闷养20-
30天后取走袋子即可。

2.根据权利要求1所述的一种捕蝇草组织培养育苗方法,其特征在于:步骤(2)中外植体消毒、清洗步骤是:先用流水冲洗30min,之后用吸水纸吸干水份,然后于超净工作台上用
75%的乙醇浸泡1 3min,期间不断摇晃外植体,再用无菌水冲洗3 5遍后用无菌镊子取出放~ ~
置在浓度为0.1 0.2%升汞中浸泡3 5min,期间不断摇晃外植体,再用无菌水冲洗5 8遍后用~ ~ ~
无菌镊子取出放置在无菌吸水纸上吸干水份,即可。

3.根据权利要求1所述的一种捕蝇草组织培养育苗方法,其特征在于:步骤(3)中,进行诱导培养时,培养室温度控制在25℃,湿度40 50%,光照4500Lux每天10小时。
~

4.根据权利要求1所述的一种捕蝇草组织培养育苗方法,其特征在于:步骤(4)中,生根培养的温度控制在25℃,光照5500Lux每天12小时。

5.根据权利要求1所述的一种捕蝇草组织培养育苗方法,其特征在于:步骤(5)中,泥炭土与珍珠岩混合基质中泥炭土与珍珠岩的体积比为4:1。
说明书

技术领域

[0001] 本发明涉及植物组织培养育苗技术领域,具体涉及一种捕蝇草组织培养育苗方法。

背景技术

[0002] 捕蝇草(Dionaea muscipula),英文名称为Venus Flytrap,是原产于北美洲的一种多年生草本植物,是一种非常有趣的食虫植物。随着人们生活水平日益改善,越来越多的花友开始种植捕蝇草。然而,在原产地的捕蝇草在生存上却受到人类活动的威胁。人口快速增加因而剥夺捕蝇草的生存空间,而且因为人为干预、自然野火的发生,使得这些原产地开始长出一些小型灌木,遮蔽捕蝇草的阳光,造成一些捕蝇草品种的濒临灭绝。
[0003] 捕蝇草的繁殖方式主要是播种繁殖和叶插繁殖。
[0004] 采用播种繁殖存在的问题为:捕蝇草可以自花授粉,但通常得进行人工授粉才确实会结果,捕蝇草因雌雄蕊不会一起成熟,人工授粉较难成功,捕蝇草的种子不耐保存,且种子非常细小直径不到一毫米,不易保存,极易损坏。
[0005] 采用叶插繁殖存在的问题为:采用叶插繁殖新芽形成很慢,并且不同品种对温湿度,光照等要求不一样,叶插繁殖难以成功。
[0006] 采用传统播种繁殖、叶插繁殖,有着成功率极低,繁殖效率缓慢等缺点,难以满足捕蝇草市场需求。目前,关于捕蝇草的繁殖研究很少,国内进行工厂化生产捕蝇草的企业很少,还没有一种关于捕蝇草组织培养育苗的方法,因此在一定程度上制约了捕蝇草的工厂化生产。

发明内容

[0007] 本发明要解决的技术问题是:提供一种捕蝇草组织培养育苗方法,提高捕蝇草组培苗栽培的成活率,节约成本,为捕蝇草工厂化生产提供关键技术。
[0008] 本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
[0009] 一种捕蝇草组织培养育苗方法,包括以下步骤:
[0010] (1)培养基制备:培养基包括诱导增殖培养基和生根培养基,诱导增殖培养基为2/3MS+6-BA01mg/L+IBA0.2mg/ml+蔗糖30g/L+琼脂5g/L+ph5.9;生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.2g/L+琼脂5g/L+ph5.9;将配制好的诱导增殖培养基和生根培养基分别以每瓶80ml装入培养瓶中,采用121℃、0.5MPa进行灭菌25min后冷却凝固备用;
[0011] (2)外植体制备:在春夏季节,选用成熟健壮4年以上的捕蝇草作为外植体母体,取新发出且鲜绿的芽头作为外植体,并进行消毒、清洗;
[0012] (3)诱导培养:接种器具进行灭菌,双手消毒后,将步骤(2)中制备得到的外植体在超净工作台内,按无菌操作要求把外植体置于步骤(1)制备得到的诱导增殖培养基中,外植体伤口处接触到诱导增殖培养基,盖好培养瓶盖后放置于消毒后的培养室内进行培养30天,即可诱导培养出完整小植株;
[0013] (4)生根培养:将诱导培养得到的完整小植株在超净工作台内按无菌要求转接入步骤(1)制备得到的生根培养基中进行生根培养2 3个月;~
[0014] (5)套袋驯化:将生根培养得到幼苗取出,用1000倍多菌灵浸泡10min后流水冲洗后种植于泥炭土与珍珠岩混合基质中,用透光的袋子罩住整株植株,放置在散光通风处闷养20-30天后取走袋子即可。
[0015] 优选的,步骤(2)中外植体消毒、清洗步骤是:先用流水冲洗30min,之后用吸水纸吸干水份,然后于超净工作台上用75%的乙醇浸泡1 3min,期间不断摇晃外植体,再用无菌~水冲洗3 5遍后用无菌镊子取出放置在浓度为0.1 0.2%升汞中浸泡3 5min,期间不断摇晃~ ~ ~
外植体,再用无菌水冲洗5 8遍后用无菌镊子取出放置在无菌吸水纸上吸干水份,即可。
~
[0016] 优选的,步骤(3)中,进行诱导培养时,培养室温度控制在25℃,湿度40 50%,光照~4500Lux每天10小时。
[0017] 优选的,步骤(4)中,生根培养的温度控制在25℃,光照5500Lux每天12小时。
[0018] 优选的,步骤(5)中,泥炭土与珍珠岩混合基质中泥炭土与珍珠岩的体积比为4:1。
[0019] 本发明的有益效果:采用上述方法后,本发明解决了传统播种繁殖、叶插繁殖成功率极低、繁殖效率缓慢等问题,运用本发明进行捕蝇草组织培养育苗,培养基繁殖系数达到4 5,繁殖一批仅需4 6个月的时间,具有繁殖系数高、繁殖速度快的特点,而且繁育出来的~ ~
种苗具有与母体相同的植物特征,抗性好。大大解决了捕蝇草繁殖困难的问题,有利于捕蝇草进行规模化、工厂化生产。

实施方案

[0020] 下面结合具体的实施例对发明进行进一步介绍:
[0021] 一种捕蝇草组织培养育苗方法,包括以下步骤:
[0022] (1)培养基制备:培养基包括诱导增殖培养基和生根培养基,诱导增殖培养基为2/3MS+6-BA01mg/L+IBA0.2mg/ml+蔗糖30g/L+琼脂5g/L+ph5.9;生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.2g/L+琼脂5g/L+ph5.9;将配制好的诱导增殖培养基和生根培养基分别以每瓶80ml装入培养瓶中,采用121℃、0.5MPa进行灭菌25min后冷却凝固备用;
[0023] (2)外植体制备:在春夏季节,选用成熟健壮4年以上的捕蝇草作为外植体母体,取新发出且鲜绿的芽头作为外植体,并进行消毒、清洗;其中,外植体消毒、清洗步骤是:先用流水冲洗30min,之后用吸水纸吸干水份,然后于超净工作台上用75%的乙醇浸泡1 3min,期~间不断摇晃外植体,再用无菌水冲洗3 5遍后用无菌镊子取出放置在浓度为0.1 0.2%升汞~ ~
中浸泡3 5min,期间不断摇晃外植体,再用无菌水冲洗5 8遍后用无菌镊子取出放置在无菌~ ~
吸水纸上吸干水份,即可;
[0024] (3)诱导培养:接种器具进行灭菌,双手消毒后,将步骤(2)中制备得到的外植体在超净工作台内,按无菌操作要求把外植体置于步骤(1)制备得到的诱导增殖培养基中,外植体伤口处接触到诱导增殖培养基,盖好培养瓶盖后放置于消毒后的培养室内进行培养30天,培养室温度控制在25℃,湿度40 50%,光照4500Lux每天10小时,即可诱导培养出完整小~植株;
[0025] (4)生根培养:将诱导培养得到的完整小植株在超净工作台内按无菌要求转接入步骤(1)制备得到的生根培养基中进行生根培养2 3个月,生根培养的温度控制在25℃,光~照5500Lux每天12小时;
[0026] (5)套袋驯化:将生根培养得到幼苗取出,用1000倍多菌灵浸泡10min后流水冲洗后种植于泥炭土与珍珠岩混合基质中,泥炭土与珍珠岩的体积比为4:1,用透光的袋子罩住整株植株,放置在散光通风处闷养20-30天后取走袋子即可。
[0027] 以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明,不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本发明的保护范围。
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