[0033] 下面结合说明书附图介绍本发明的较佳实施例，举例证明本发明可以实施，通过向本领域中的技术人员完整介绍本发明，使其技术内容更加清楚和便于理解。本发明可以通过许多不同形式的实施例来得以体现，其保护范围并非仅限于文中提到的实施例，本文的附图和说明本质上是举例说明而不是限制本发明。
[0034] 下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
[0035] 其它所用的原材料、试剂和设备等，如无特殊说明，均可从商业途径得到或已公开。
[0036] 下面结合实施例对本发明做详细的说明。
[0037] 实施例1：Sericin‑Pt NCs的制备
[0038] (1)取250mg丝胶蛋白加入5mL纯水中制备成50mg/mL的丝胶蛋白溶液，取此溶液5mL在其中加入1mL 25mM的H2PtCl6水溶液，涡旋器充分混匀5min。
[0039] (2)加入1M的NaOH溶液于上一步的溶液中，使pH值为11。加水补足至10mL，涡旋器再次混匀5min。
[0040] (3)将EP管在避光的条件下置于60℃水浴锅中12h，得到铂纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min，取上清液置于4℃冰箱避光保存备用。
[0041] 实施例2
[0042] (1)取125mg丝胶蛋白加入5mL纯水中制备成25mg/mL的丝胶蛋白溶液，取此溶液5mL在其中加入1mL 50mM的H2PtCl6水溶液，涡旋器充分混匀10min。
[0043] (2)加入1M的NaOH溶液于上一步的溶液中，使pH值为10。加水补足至10mL，涡旋器再次混匀5min。
[0044] (3)将EP管在避光的条件下置于37℃水浴锅中8h，得到铂纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min，取上清液置于4℃冰箱避光保存备用。
[0045] 实施例3
[0046] (1)取250mg丝胶蛋白加入5mL纯水中制备成50mg/mL的丝胶蛋白溶液，取此溶液5mL在其中加入1mL 100mM的H2PtCl6水溶液，涡旋器充分混匀10min。
[0047] (2)加入1M的NaOH溶液于上一步的溶液中，使pH值为12。加水补足至10mL，涡旋器再次混匀5min。
[0048] (3)将EP管在避光的条件下置于50℃水浴锅中16h，得到铂纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min，取上清液置于4℃冰箱避光保存备用。
[0049] 实施例4
[0050] (1)取250mg丝胶蛋白加入5mL纯水中制备成50mg/mL的丝胶蛋白溶液，取此溶液5mL在其中加入1mL 50mM的Na2PtCl6·6H2O水溶液，涡旋器充分混匀10min。
[0051] (2)加入1M的NaOH溶液于上一步的溶液中，使pH值为11。加水补足至10mL，涡旋器再次混匀5min。
[0052] (3)将EP管在避光的条件下置于60℃水浴锅中14h，得到铂纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min，取上清液置于4℃冰箱避光保存备用。
[0053] 实施例5
[0054] (1)取250mg丝胶蛋白加入5mL纯水中制备成50mg/mL的丝胶蛋白溶液，取此溶液5mL在其中加入1mL 100mM的K2PtCl6水溶液，涡旋器充分混匀10min。
[0055] (2)加入1M的NaOH溶液于上一步的溶液中，使pH值为9。加水补足至10mL，涡旋器再次混匀5min。
[0056] (3)将EP管在避光的条件下置于37℃水浴锅中16h，得到铂纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min，取上清液置于4℃冰箱避光保存备用。
[0057] 实施例6
[0058] (1)取125mg丝胶蛋白加入5mL纯水中制备成25mg/mL的丝胶蛋白溶液，取此溶液5mL在其中加入1mL 50mM的N2H8PtCl6水溶液，涡旋器充分混匀10min。
[0059] (2)加入1M的NaOH溶液于上一步的溶液中，使pH值为12。加水补足至10mL，涡旋器再次混匀5min。
[0060] (3)将EP管在避光的条件下置于50℃水浴锅中12h，得到铂纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min，取上清液置于4℃冰箱避光保存备用。
[0061] 实施例7：Sericin‑Pt NCs样品形貌表征
[0062] 取实施例1所制的Sericin‑Pt NCs(在冰箱中放置的备用的上清液)用去离子水稀释20倍后，取10μL滴于铜网，美国FEI Tecnai G‑20型透射电子显微镜(TransmissionElectron Microscope,TEM)，加速电压100kV。结果显示铂纳米簇均匀分布(图1)，其平均粒径约为2nm，该铂纳米簇在水溶液中具有良好的分散性。
[0063] 实施例8：Sericin、Sericin‑Pt NCs紫外光谱的表征
[0064] 分别取实施例1制备的Sericin水溶液及Sericin‑Pt NCs放入比色皿中，使用紫外分光光度仪UV‑1700检测紫外光谱，结果表明Sericin在280nm处有紫外吸收，而Sericin‑Pt NCs在此处没有最大吸收，且其在300‑400nm范围具有较宽的吸收图谱(图2)，证明实施例1所制的Sericin‑Pt NCs和Sericin本身不是同一种物质。
[0065] 实施例9：Sericin、Sericin‑Pt NCs红外光谱的表征
[0066] 分别取纯的丝胶蛋白(Sericin)及实施例1所制的Sericin‑Pt NCs使用红外分析光谱检测红外光谱，结果表明Sericin和的Sericin‑Pt NCs在多处有明显不同(图3)，证明实施例1所制的Sericin‑Pt NCs和Sericin本身不是同一种物质。
[0067] 实施例10：Silksericin‑Pt NCs荧光光谱的表征
[0068] 分别取实施例1制备的Sericin水溶液及Sericin‑Pt NCs置于EP管中，采用暗箱式四用紫外分析仪，观察它们的的荧光特性，结果表明在365nm紫外灯照射下，Sericin‑Pt NCs溶液发射出强烈的青色荧光，可见光下Sericin‑Pt NCs溶液为浅黄色，而Sericin水溶液在可见光下为无色。
[0069] 取实施例1所制的Sericin‑Pt NCs放入比色皿中，使用RF‑5301荧光分光光度计测量Sericin‑Pt NCs的最大激发光谱和最大发射光谱，结果表明该物质最大激发光谱和最大发射光谱分别为320nm和440nm(图4)。
[0070] 实施例11：实施例1所制的Sericin‑Pt NCs应用于氯吡硫磷的检测
[0071] 向铂纳米簇体系中加入一系列不同浓度的氯吡硫磷溶液，检测标准体系为1mL，其中不同浓度的氯吡硫磷溶液50μL，25mg/mL的Sericin‑Pt NCs 50μL，加水补足至1mL，25℃水浴5min后，在激发光波长为320nm的条件下，检测溶液在440nm的发射光的峰高。结果显示，Sericin‑Pt NCs荧光淬灭程度随氯吡硫磷浓度的增大而增强(图5)，其相对荧光强度线2
性检测曲线为y＝0.00161x+0.99783(R＝0.993)。所构建的检测氯吡硫磷的线性范围为25μM‑350μM，其检测限为2.26μM(图6)。结果表明，实施例1所制的Sericin‑Pt NCs对氯吡硫磷具有高度选择性，因此本发明所制的铂纳米簇荧光探针同样可用于分析检测实际样品中氯吡硫磷的含量。
[0072] 实施例12：实施例1所制的Sericin‑Pt NCs对实际水样中氯吡硫磷的监测[0073] 为了更清楚的说明本发明实施例的应用方案，证实Sericin‑Pt NCs作为探针检测氯吡硫磷的实用性，下面将详细介绍氯吡硫磷对实际水样检测过程。从芜湖市采集了长江水、镜湖水和自来水样本。将取自不同环境中的水样10,000rpm离心10min，0.22μm滤膜抽滤，并储存在4℃冰箱中备用。
[0074] (1)实际水样的检测：
[0075] 检测体系为1mL，其中25mg/mL的Sericin‑Pt NCs溶液50μL，待测的环境水样950μL；将此体系于25℃水浴5min，在激发光波长为320nm的条件下，检测溶液在440nm的发射光的峰高；将测试结果带入实施例11绘制的标准曲线中计算。
[0076] 将芜湖市长江水，镜湖水，自来水分别按照上述方法进行检测，实验独立重复3次。三种水样的检测结果均为0μM。
[0077] (2)检测加标回收率：
[0078] 在三个环境水样中分别添加浓度为25μM、50μM和100μM的氯吡硫磷溶液标样，进行检测并计算各水样的氯吡硫磷回收率。检测标准体系为1mL，其中25mg/mL的Sericin‑Pt NCs溶液50μL，环境水样900μL，不同浓度的氯吡硫磷50μL，将此体系于25℃水浴5min，在激发光波长为320nm的条件下，检测溶液在440nm的发射光的峰高。实验独立重复3次。表1是标准加入不同浓度系列的氯吡硫磷后的结果，可以看出，回收率可以达到95％以上。说明该方法在实际水样中的应用效果良好。
[0079] 表1 Sericin‑Pt NCs对各水样中氯吡硫磷的检测
[0080]
[0081] 实施例13：实施例1所制的Sericin‑Pt NCs对实际土样中氯吡硫磷的检测[0082] 为了更清楚的说明本发明实施例的应用方案，证实Sericin‑Pt NCs作为探针检测氯吡硫磷的实用性，下面将详细介绍氯吡硫磷对实际土样检测过程。从芜湖市采集葡萄种植园的土样、农田土样以及安徽师范大学赭山校区的土样。将不同环境中的土样置于60℃烘箱烘干2h，加去离子水稀释10倍溶解后10,000rpm离心10min，并储存在4℃冰箱中备用。
[0083] (1)实际土样的检测：
[0084] 检测体系为1mL，其中50μL 25mg/mL的Sericin‑Pt NCs溶液，950μL待测的土样稀释液；将此体系于25℃水浴5min，在激发光波长为320nm的条件下，检测溶液在440nm的发射光的峰高；将测试结果带入实施例11绘制的标准曲线中计算。
[0085] 将三种土壤样品分别按照上述方法进行检测，实验独立重复3次。三种土样的检测结果均为0μM。
[0086] (2)检测加标回收率：
[0087] 检测标准体系为1mL，50μL 25mg/mL的Sericin‑Pt NCs溶液，900μL的土样稀释液，50μL不同浓度的氯吡硫磷溶液，25℃水浴5min，在激发光波长为320nm的条件下，检测溶液在440nm的发射光的峰高，实验独立重复3次，同时对实际土样的回收率进行计算。为了计算实际土样中氯吡硫磷的回收率，分别在25μM、50μM和100μM的氯吡硫磷浓度下，对三种实际土样样品进行加标样中氯吡硫磷的回收率计算。表2是标准加入不同浓度系列的氯吡硫磷后的结果，可以看出，回收率可以达到95％以上。说明该方法在实际土样中的应用效果良好。
[0088] 表2 Sericin‑Pt NCs对各土样中氯吡硫磷的检测
[0089]
[0090] 实施例14：实施例1所制的Sericin‑Pt NCs对水果蔬菜样品中氯吡硫磷的检测[0091] 为了更清楚的说明本发明实施例的应用方案，证实Sericin‑Pt NCs作为探针检测氯吡硫磷的实用性，下面将详细介绍氯吡硫磷对水果蔬菜样品检测过程。分别从芜湖市商品市场购买了苹果、生菜和菠菜。将不同样品放置于研钵中研磨5min，充分研磨得到植物提取液，移取植物提取液200μL至1.5mL的EP管中，其中苹果研磨液稀释50倍后10,000rpm离心10min，并储存在4℃冰箱中备用。生菜和菠菜研磨液稀释600倍后10,000rpm离心10min，并储存在4℃冰箱中备用。
[0092] (1)水果蔬菜的检测：
[0093] 检测体系为1mL，其中50μL 25mg/mL的Sericin‑Pt NCs溶液，950μL待测的样品稀释液；将此体系于25℃水浴5min，在激发光波长为320nm的条件下，检测溶液在440nm的发射光的峰高；将测试结果带入实施例11绘制的标准曲线中计算。
[0094] 将待测样品分别按照上述方法进行检测，实验独立重复3次。待测样品的检测结果均为0μM。
[0095] (2)检测加标回收率：
[0096] 检测标准体系为1mL，50μL 25mg/mL的Sericin‑Pt NCs溶液，900μL待测样品溶液，50μL不同浓度的氯吡硫磷溶液，25℃水浴5min，在激发光波长为320nm的条件下，检测溶液在440nm的发射光的峰高，实验独立重复3次，同时对各样品的回收率进行计算。为了计算实际样品中氯吡硫磷的回收率，分别在25μM、50μM和100μM的氯吡硫磷浓度下，对苹果、生菜、菠菜样品进行加标样中氯吡硫磷的回收率。表3是标准加入不同浓度系列的氯吡硫磷后的结果，可以看出，回收率可以达到95％以上。说明该方法在实际水果蔬菜样品中的应用效果良好。
[0097] 表3 Sericin‑Pt NCs对各水果蔬菜样品中氯吡硫磷的检测
[0098]
[0099] 实施例15：实施例1所制的Sericin‑Pt NCs应用于氯霉素的检测
[0100] 向铂纳米簇体系中加入一系列不同浓度的氯霉素溶液，检测标准体系为1mL，其中不同浓度的氯霉素50μL，25mg/mL的Sericin‑Pt NCs 50μL，加水补足至1mL，25℃水浴5min后，在激发光波长为320nm的条件下，检测溶液在440nm的发射光的峰高。结果显示，Sericin‑Pt NCs荧光淬灭程度随氯霉素浓度的增大而增强(图7)，其相对荧光强度线性检2
测曲线为y＝1.63763x+0.93013(R＝0.99673)，所构建的检测氯霉素的线性范围为100μM‑
1100μM，其检测限为12μM(图8)。结果表明，实施例1所制的Sericin‑Pt NCs对氯霉素具有高度选择性，因此本发明所制的铂纳米簇荧光探针同样可用于分析检测实际样品中氯霉素的含量。
