[0004] 本发明所要解决的技术问题是,克服以上背景技术中提到的不足和缺陷,提供一种克服马唐抗药性的间型弯孢菌,具体为一种间型弯孢菌菌株及其应用和除草剂。
[0005] 为解决上述技术问题,从湖南地区棉花田自然发病的马唐中分离、筛选得到1株具有强致病力的菌株,从形态学和分子生物学方面对其进行了鉴定,同时对其生物防治效果和作物安全性进行了评估,旨在为马唐真菌除草剂的研发提供依据,解决湖南棉田马唐的抗药性问题。本发明提出的技术方案为提供一种间型弯孢菌菌株,所述间型弯孢菌(Curvularia intermedia)菌株命名为mt-3,其于2016年12月23日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO.13376。
[0006] 本发明的间型弯孢菌,是一种马唐致病菌,寄主范围广,寄主范围包括马唐、牛筋草、千金子、狗尾草、鳢肠和马齿苋等,对玉米和棉花等作物无害,可用作玉米和棉花等作物田间的微生物除草剂制备。间型弯孢菌(Curvularia intermedia)mt-3与背景技术提到的这些菌株比较,杀草谱更广泛,对马唐、牛筋草、旱稗、马齿苋等杂草均有防治效果,适合用于棉花田除草;另外,具有发酵工艺简单,制剂配方成熟,有推广应用前景。
[0007] 上述的间型弯孢菌菌株的分离方法,包括如下步骤:
[0008] (1)从马唐自然发病的叶片病健交界处剪取组织块,于质量浓度为0.1%的氯化汞溶液中进行表面消毒3min,用无菌水冲洗3次;
[0009] (2)将所述步骤(1)冲洗后得到的组织块置于PDA培养基上进行恒温培养,恒温培养的温度为28℃;
[0010] (3)待所述步骤(2)恒温培养长出菌落后,从菌落边缘挑取菌丝,移入新的PDA培养基上培养,经过分离纯化得到所述的间型弯孢菌菌株。
[0011] 基于一个总的技术构思,本发明还提供一种上述间型弯孢菌mt-3在制备除草剂中的应用,包括以下步骤:利用间型弯孢菌mt-3接种于PD培养液(酵母浸出粉胨葡萄糖培养液)后进行震荡培养,真空抽滤培养液,经微孔滤膜过滤后得到包含间型弯孢孢子的发酵液,再利用发酵液或发酵液中的间型弯孢孢子制备所述的除草剂。
[0012] 上述的应用,优选的,所述震荡培养的温度为28℃,震荡培养的转速为150r/min,震荡培养的时间为7d;
[0013] 更优选的,所述发酵液中含有20-1000亿间型弯孢孢子/克。
[0014] 一种除草剂,剂型为水剂,主要由所述间型弯孢菌mt-3的发酵液组成,所述发酵液中含有间型弯孢孢子。
[0015] 优选的,所述水剂的除草剂包括质量分数的发酵液95-99%和吐温80 1-5%,所述发酵液中含有20-1000亿间型弯孢孢子/克。
[0016] 更优选的,所述发酵液由间型弯孢菌mt-3接种于PD培养液后经震荡培养、真空抽滤及微孔滤膜过滤后制得;所述震荡培养的温度为28℃,震荡培养的转速为150r/min,震荡培养的时间为7d。
[0017] 一种除草剂,剂型为可湿性粉剂,主要由所述间型弯孢菌mt-3的间型弯孢孢子组成。
[0018] 优选的,所述可湿性粉剂的除草剂包括以下质量分数的各组分:间型弯孢孢子70%、崩悬剂DK8 3%、润湿剂1%、白炭黑3%和高岭土23%。
[0019] 更优选的,所述间型弯孢孢子由间型弯孢菌mt-3接种于PD培养液后经震荡培养、真空抽滤及微孔滤膜过滤得到发酵液,然后从发酵液中分离得到;所述震荡培养的温度为28℃,震荡培养的转速为150r/min,震荡培养的时间为7d。
[0020] 本发明的除草剂,成分简单,环境友好,施用简单,杀草谱广,在对玉米和棉花等作物无害的前提下,对马唐、牛筋草、千金子、狗尾草、旱稗、鳢肠和马齿苋等杂草的防治效果达到了75%以上,除草效果见效快,是一种可长期投入使用的生物除草剂。
[0021] 与现有技术相比,本发明的有益效果为:
[0022] 1、本发明的间型弯孢菌,命名为间型弯孢菌mt-3,是一种马唐致病菌,寄主范围广,寄主范围包括马唐、牛筋草、千金子、狗尾草、鳢肠和马齿苋等,对玉米和棉花等作物无害,可用作玉米和棉花等作物田间的微生物除草剂制备。
[0023] 2、本发明的除草剂,成分简单,环境友好,施用简单,杀草谱广,在对玉米和棉花等作物无害的前提下,对马唐、牛筋草、千金子、狗尾草、鳢肠和马齿苋等杂草的防治效果达到了75%以上,除草效果见效快,是一种可长期投入使用的生物除草剂。
[0024] 生物材料保藏情况说明:
[0025] 一种间型弯孢菌菌株,所述间型弯孢菌(Curvularia intermedia)菌株命名为mt-3,其于2016年12月23日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,该保藏机构的简称为CGMCC,该保藏机构的地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号为CGMCC NO.13376。