[0005] 本发明的目的是为了增强蔗渣木聚糖的抗肿瘤活性，提供一种蔗渣木聚糖丁香酸酯-g-AM/MMA/BA的合成方法。
[0006] 本发明的具体步骤为：
[0007] (1)将蔗渣木聚糖于60℃真空恒温干燥箱中干燥24小时至恒重，得干基蔗渣木聚糖。
[0008] (2)称取5.0～8.0g步骤(1)所得干基蔗渣木聚糖加入到250mL的四口烧瓶中，并向其中加入20～40mL的蒸馏水，在40～60℃的条件下充分搅拌30～45分钟。
[0009] (3)称量0.4～0.8g过硫酸铵，0.7～1.0g亚硫酸氢钠于烧杯中，然后向烧杯中加入15～30mL的蒸馏水，搅拌均匀，配制引发剂混合溶液。
[0010] (4)将步骤(3)所得引发剂的混合溶液倒入恒压滴液漏斗中，向步骤(2)所得体系中开始滴加引发剂混合液，控制在5～7小时滴加完毕。
[0011] (5)称量4.0～7.0g丙烯酰胺(AM)、5.0～7.0mL分析纯丙烯酸丁酯(BA)和5.0～6.0mL分析纯甲基丙烯酸甲酯(MMA)于烧杯中，然后向其中加入30～45mL的蒸馏水、0.3～
0.4g N,N’-亚甲基双丙烯酰胺和1～1.5g工业级OP-10，搅拌20～30分钟，配制混合单体溶液。
[0012] (6)将步骤(5)所得单体混合溶液倒入恒压滴液漏斗中，待步骤(4)所滴加的引发剂滴加完成1/3后，开始向步骤(2)所得体系中滴加混合单体溶液，控制在6～8小时滴加完毕。
[0013] (7)待反应结束后，向步骤(6)所得物料体系中加入50～70mL分析纯丙酮沉析15～25分钟，析出沉淀后抽滤，得到粗产物蔗渣木聚糖-g-AM/MMA/BA。
[0014] (8)将步骤(7)所得粗产物分别用20～30mL分析纯无水乙醇洗涤沉淀3次后送入50℃的真空恒温干燥箱中干燥24小时至恒重，即得蔗渣木聚糖-g-AM/MMA/BA。
[0015] (9)称取2.0～3.0g步骤(8)所得产物蔗渣木聚糖-g-AM/MMA/BA加入250mL的四口烧瓶中，并向其中加入0.9～2.0g丁香酸和20～30mL分析纯N,N-二甲基乙酰胺(DMA)，搅拌下升温至75～85℃，继续搅拌10～20分钟。
[0016] (10)向步骤(9)所得物料体系中加入0.5～0.8g过硫酸铵和2.0～3.0g二环己基碳二亚胺(DCC)，在75～85℃的条件下搅拌反应7～10小时。
[0017] (11)抽滤步骤(10)所得物料，分别用20～30mL分析纯无水乙醇洗涤沉淀3次后送入50℃的真空恒温干燥箱中干燥24小时至恒重，即得产物蔗渣木聚糖丁香酸酯-g-AM/MMA/BA。
[0018] (12)采用酸碱滴定法对步骤(11)所得产物进行丁香酸酯化取代度测定，具体方法及步骤如下：准确称取约0.5g样品置入50mL锥形瓶中，加入10mL蒸馏水，摇匀，加入2滴5％的酚酞指示剂，用浓度为0.1mol/L的NaOH标准溶液滴定至浅红色(30s内不会褪色)。再用移液管加入2.5mL浓度为0.5mol/L的NaOH标准溶液，摇匀，密封，在室温下震荡皂化4小时。之后用浓度为0.5mol/L的盐酸标准溶液滴定至无色，即为滴定终点。丁香酸酯化取代度(DSC)的计算式如下：
[0019]
[0020]
[0021] 式中：
[0022] w——蔗渣木聚糖丁香酸酯-g-AM/MMA/BA中含有丁香酰基的质量分数，％；
[0023] V0——滴定蔗渣木聚糖消耗盐酸标准溶液体积，单位mL；
[0024] V1——滴定丁香酸蔗渣木聚糖酯消耗的盐酸标准溶液体积，单位mL；
[0025] CHCl——盐酸标准溶液浓度，单位mol/L；
[0026] m——丁香酸蔗渣木聚糖酯样品的质量，单位g；
[0027] 198和132——丁香酰基和蔗渣木聚糖脱水木糖单元的相对分子质量。
[0028] (13)测定步骤(11)所得产物中单体接枝率和接枝效率，具体方法和步骤如下：将接枝共聚物用丙酮沉淀后，分别用分析纯无水乙醇10～20mL洗涤2～3次，在55℃真空干燥箱中干燥至恒重，得到接枝共聚粗产物。然后，在索氏提取器中用丙酮作为溶剂将粗产物抽提24小时，除去均聚物后得到纯接枝共聚物。接枝率G和接枝效率GE的计算方法如下：
[0029]
[0030]
[0031] 式中：
[0032] Wg——酯化接枝共聚物的质量，g；
[0033] W0——原BX的质量，g；
[0034] W1——接枝支链的质量，g；
[0035] W2——单体的质量，g。
[0036] 本发明以蔗渣木聚糖为起始原料，以适量的过硫酸铵为引发剂，N,N’-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂，在水溶液中将AM/MMA/BA单体接枝到蔗渣木聚糖主链上，首先合成了蔗渣木聚糖-g-AM/MMA/BA；然后以丁香酸为酯化剂，在N,N-二甲基乙酰胺溶剂中合成最终产物蔗渣木聚糖丁香酸酯-g-AM/MMA/BA。本发明所得目标产物不仅增强了原蔗渣木聚糖的生物相容性，而且反应引入丁香酸、AM、MMA和BA分子的基团显著提高了其抗肿瘤和抗菌等生物活性，在医药学领域具有广阔的应用前景。
