[0005] 针对以上不足,本发明提供了一种异硫氰酸荧光素修饰的聚多巴胺复合材料,并用该PDA-FITC复合材料作为荧光探针快速检测三价金离子浓度,该PDA-FITC复合材料制备
方法简单,检测金离子浓度方法快速,灵敏度高、选择性好、检测结果准确可靠,且成本低廉,绿色环保等。
[0006] 本发明采取的技术方案为:一种异硫氰酸荧光素修饰的聚多巴胺复合材料的制备方法,包括如下步骤:
[0007] 1)在装有乙醇水溶液的烧杯中加入氨水,调节pH至8.4-8.6,得混合溶液,其中,氨水与乙醇水溶液的体积比为1:(48-52);
[0008] 2)在步骤1)所得的混合溶液中加入多巴胺盐酸盐和异硫氰酸荧光素FITC,置于30℃水浴中搅拌28-30h,得悬浮液,其中,多巴胺盐酸盐和异硫氰酸荧光素FITC的质量比为
(50-200):(2.5-10),多巴胺盐酸盐在乙醇水溶液中的固含量为(1.5-7)mg/mL;
[0009] 3)在步骤2)所得的悬浮液中加入HCl稀溶液,调节pH至4.8-5.0,置于离心机中离心,得下层沉淀,再将离心好的下层沉淀分散到蒸馏水中,即为PDA-FITC复合材料水溶液,其中,蒸馏水与乙醇水溶液的体积比为1:2。
[0010] 优选地,所述多巴胺盐酸盐和异硫氰酸荧光素FITC的质量比为20:1。
[0011] 所述乙醇水溶液的体积百分比浓度为25%-35%。
[0012] 所述氨水的质量百分比浓度为28%,HCl稀溶液的浓度为1mol/L。
[0013] 所述离心转速为6000-8000r/min,时间为25-30min。
[0014] 采用上述异硫氰酸荧光素修饰的聚多巴胺复合材料的制备方法制备的PDA-FITC复合材料在检测Au3+离子浓度方面的应用,采用下述方法步骤:
[0015] 取一系列5mL具塞刻度比色管,分别向每支比色管中加入100μL上述制备的PDA-FITC复合材料水溶液和100μL PBS缓冲溶液,再分别向每支比色管中加入0-600μL不同体积的金离子水溶液,每支比色管稀释至1mL,反应至少5min后,置于荧光比色皿中在激发波长
470nm、发射波长523nm时测定荧光强度;以Au3+浓度为横坐标,反应液在523nm波长处的荧光强度值为纵坐标,在直角坐标系中作图,得到Au3+浓度与荧光强度之间的线性关系图,根据它们之间的这种线性关系以检测Au3+的浓度。
[0016] 所述线性关系图中的工作曲线为y=40.72+23.57x,线性相关系数R2为0.98。
[0017] 所述PBS缓冲溶液的pH为4.8-5.0。
[0018] 所述的金离子水溶液的终浓度分别为0μM、2μM、5μM、8μM、10μM、15μM、20μM、25μM、30μM、40μM、50μM、60μM。
[0019] 所述PDA-FITC复合材料在检测Au3+离子浓度方面的应用,具体步骤如下:
[0020] A、PDA-FITC复合材料的制备:在30mL乙醇水溶液中加入0.6mL氨水调节pH至8.5,之后加入50~200mg多巴胺盐酸盐和2.5~10mg异硫氰酸荧光素FITC,再置于30℃水浴中搅
拌30h后加入HCl稀溶液调节pH至5.0,将调好pH的悬浮液用离心机离心得下层沉淀,将离心好的下层沉淀再分散到60mL蒸馏水中,即得PDA-FITC复合材料水溶液;
[0021] B、对Au3+的检测:取12支5mL具塞刻度比色管,分别向每支比色管中加入100μL步骤A制备的PDA-FITC复合材料水溶液和100μL pH为4.8-5.0的PBS缓冲溶液,然后分别向每支比色管中依次加入0μL、20μL、50μL、80μL、100μL、150μL、200μL、250μL、300μL、400μL、500μL、
600μL浓度为100μM的氯金酸水溶液,每支比色管稀释至1mL,反应至少5min后,置于荧光比色皿中在激发波长470nm、发射波长523nm时测定荧光强度;以Au3+浓度为横坐标,反应液在
523nm波长处的荧光强度值为纵坐标,在直角坐标系中作图,得到Au3+浓度与荧光强度之间
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的线性关系图,其线性关系图中的工作曲线为y=40.72+23.57x,线性相关系数R为0.98,
根据它们之间的这种线性关系以检测Au3+的浓度。
[0022] 所述检测方法能够排除其他离子的干扰;所述的其他离子为:K+、Ca2+、Na+、Mg2+、Ba2+、Fe2+、Fe3+、Co2+、Ni2+、Cu2+、Zn2+、Mn2+、Ag+、Cd2+。
[0023] 本发明的有益效果:本发明采用异硫氰酸荧光素FITC修饰的聚多巴胺PDA复合材料作为荧光探针对Au3+离子浓度进行测定,通过荧光共振能量转移FRET作用猝灭FITC的荧
光,而其他离子对荧光素荧光没有影响。该方法简单快速,能够实时检测水环境、催化剂和纳米材料合成中Au3+含量,有利于环境污染监测和控制以及合成材料的试剂种类和最佳用
量。另外,PDA-FITC荧光探针能够长期稳定存在,光学稳定性好;检测方法简单、灵敏度高、选择性好、检测结果准确可靠,且成本低廉,不涉及昂贵的化学试剂、仪器和有毒有害化学试剂,绿色环保。