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一种铜金铂复合纳米材料的制备方法及其在检测半胱氨酸上的应用   0    0

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专利申请流程有哪些步骤?
专利申请流程图
申请
申请号:指国家知识产权局受理一件专利申请时给予该专利申请的一个标示号码。唯一性原则。
申请日:提出专利申请之日。
2018-06-11
申请公布
申请公布指发明专利申请经初步审查合格后,自申请日(或优先权日)起18个月期满时的公布或根据申请人的请求提前进行的公布。
申请公布号:专利申请过程中,在尚未取得专利授权之前,国家专利局《专利公报》公开专利时的编号。
申请公布日:申请公开的日期,即在专利公报上予以公开的日期。
2018-11-30
授权
授权指对发明专利申请经实质审查没有发现驳回理由,授予发明专利权;或对实用新型或外观设计专利申请经初步审查没有发现驳回理由,授予实用新型专利权或外观设计专利权。
2021-08-13
预估到期
发明专利权的期限为二十年,实用新型专利权期限为十年,外观设计专利权期限为十五年,均自申请日起计算。专利届满后法律终止保护。
2038-06-11
基本信息
有效性 有效专利 专利类型 发明专利
申请号 CN201810595045.6 申请日 2018-06-11
公开/公告号 CN108746660B 公开/公告日 2021-08-13
授权日 2021-08-13 预估到期日 2038-06-11
申请年 2018年 公开/公告年 2021年
缴费截止日
分类号 B22F9/24B22F1/00G01N21/78B82Y30/00B82Y40/00 主分类号 B22F9/24
是否联合申请 独立申请 文献类型号 B
独权数量 1 从权数量 1
权利要求数量 2 非专利引证数量 0
引用专利数量 0 被引证专利数量 0
非专利引证
引用专利 被引证专利
专利权维持 4 专利申请国编码 CN
专利事件 事务标签 实质审查、授权
申请人信息
申请人 第一申请人
专利权人 盐城工学院 当前专利权人 盐城工学院
发明人 姜翠凤、包帅、魏晓秀、杨子润、莫贵和 第一发明人 姜翠凤
地址 江苏省盐城市世纪大道1166号研创大厦 邮编 224599
申请人数量 1 发明人数量 5
申请人所在省 江苏省 申请人所在市 江苏省盐城市
代理人信息
代理机构
专利代理机构是经省专利管理局审核,国家知识产权局批准设立,可以接受委托人的委托,在委托权限范围内以委托人的名义办理专利申请或其他专利事务的服务机构。
南京经纬专利商标代理有限公司 代理人
专利代理师是代理他人进行专利申请和办理其他专利事务,取得一定资格的人。
殷星
摘要
本发明公开了一种铜金铂复合纳米材料的制备方法及其在检测半胱氨酸上的应用。向水中加入硫酸铜溶液和柠檬酸钠溶液,再加入新鲜的NaBH4,待溶液呈浅黄色后,加入HAuCl4水溶液搅拌后,置于12‑16℃下储存,即得Cu@AuNPs,放入冰箱中避光冷藏备用;取Cu@AuNPs加至K2PtCl6溶液中,边搅拌边加热至80℃后,再逐滴加入抗坏血酸继续搅拌至溶液变成黑色,即可。本发明制备得到的铜金铂复合纳米材料具有过氧化物酶样活性,能够使TMB和双氧水体系显示蓝色,而半胱氨酸的加入,能够抑制过氧化物酶样活性,根据体系颜色变化,便可实现可视化检测半胱氨酸浓度。
  • 摘要附图
    一种铜金铂复合纳米材料的制备方法及其在检测半胱氨酸上的应用
  • 说明书附图:图1
    一种铜金铂复合纳米材料的制备方法及其在检测半胱氨酸上的应用
  • 说明书附图:
    一种铜金铂复合纳米材料的制备方法及其在检测半胱氨酸上的应用
  • 说明书附图:图2
    一种铜金铂复合纳米材料的制备方法及其在检测半胱氨酸上的应用
  • 说明书附图:图3
    一种铜金铂复合纳米材料的制备方法及其在检测半胱氨酸上的应用
法律状态
序号 法律状态公告日 法律状态 法律状态信息
1 2021-08-13 授权
2 2018-11-30 实质审查的生效 IPC(主分类): B22F 9/24 专利申请号: 201810595045.6 申请日: 2018.06.11
权利要求
权利要求书是申请文件最核心的部分,是申请人向国家申请保护他的发明创造及划定保护范围的文件。
1.一种铜金铂复合纳米材料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,Cu@Au的制备
向5mL水中加入20‑80μl,0.1M硫酸铜溶液和20‑80μl,0.1M柠檬酸钠溶液,然后加入
0.5‑1.5ml新鲜的NaBH4溶液,待溶液呈浅黄色后,加入20‑80μl,0.1M HAuCl4水溶液,搅拌
15‑25分钟后,置于12‑16℃下储存24小时,即得铜/金复合纳米材料Cu@AuNPs,放入冰箱中避光冷藏备用;
步骤2,Cu@Au/Pt的制备
取2ml上述制备的Cu@AuNPs,加至5ml 1.0mM的K2PtCl6溶液中,边搅拌边加热至80℃后,再逐滴加入5ml浓度为5mM的抗坏血酸,继续搅拌至溶液变成黑色,即得铜金铂复合纳米材料。

2.根据权利要求1所述的一种铜金铂复合纳米材料的制备方法,其特征在于,所述新鲜的NaBH4溶液的制备方法为,取3.8mg NaBH4溶于4ml冰水中,摇动至完全溶解,即得新鲜的NaBH4溶液。
说明书

技术领域

[0001] 本发明涉及化学测试分析技术领域,具体涉及一种铜金铂复合纳米材料的制备方法及其在检测半胱氨酸上的应用。

背景技术

[0002] 半胱氨酸在人的生理和病理过程中扮演着十分重要的角色,异常的半胱氨酸含量可能引起各种疾病。因此,半胱氨酸的定量检测是很有意义的。而现在用于半胱氨酸检测的方法,主要包括酶循环法、电化学法、荧光法等,这些方法的样品制备繁琐,检测过程复杂。
[0003] 申请号2015101805572,名称为一种基于氧化石墨烯‑纳米铂复合材料测定半胱氨酸的方法,其特征是利用氧化石墨烯‑纳米铂复合材料模拟过氧化物酶活性,催化过氧化氢氧化3, 3’, 5, 5’‑四甲基联苯胺盐酸盐的显色过程,而半胱氨酸可抑制该显色体系,从而用于半胱氨酸的检测。半胱氨酸浓度在25‑5000 nmol/l范围内,显色产物的吸光度与半胱氨酸对数浓度呈线性相关(r=0.998),检测限为1.2 nmol/l。该法可用于半胱氨酸胶囊含量测定。
[0004] 氧化石墨烯为片状结构,且尺寸一般在微米级别,作为催化剂,其均匀性和单分散性不够好。另外,氧化石墨烯的制备工艺比较复杂,对设备要求高。

发明内容

[0005] 针对现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种铜金铂复合纳米材料的制备方法及其在检测半胱氨酸上的应用,该制备方法简单,在半胱氨酸检测上可操作性强,速度快,便于推广。
[0006] 一种铜金铂复合纳米材料的制备方法,包括以下步骤:
[0007] 步骤1,Cu@Au的制备
[0008] 向5 ml水中加入20‑80μl,0.1 M CuSO4和20‑80μl,0.1M柠檬酸钠的水溶液,然后加入0.5‑1.5ml新鲜的NaBH4溶液,待溶液呈浅黄色后,加入20‑80μl,0.1M HAuCl4水溶液,搅拌15‑25分钟后,置于12‑16℃下储存24小时,即得铜/金复合纳米材料Cu@AuNPs,放入冰箱中避光冷藏备用;该步骤中所用的硼氢化钠需要新鲜的,配制时间长了,硼氢化钠会和水反应,所得溶液不能参与现阶段的反应,影响实验结果。
[0009] 步骤2,Cu@Au/Pt的制备
[0010] 取2ml上述制备的Cu@AuNPs,加至5ml 1.0 mM 的K2PtCl6溶液中,边搅拌边加热至80℃后,再逐滴加入5ml 浓度为5mM的抗坏血酸,继续搅拌至溶液变成黑色,即得铜金铂复合纳米材料。
[0011] 作为改进的是,所述新鲜的NaBH4溶液的制备方法为,取3.8 mg NaBH4溶于4 ml 冰水中,搅拌至完全溶解,即得新鲜的NaBH4溶液。
[0012] 上述制备的铜金铂复合纳米材料在检测半胱氨酸上的应用。
[0013] 作为改进的是,所述应用的检测范围为0‑3mM。
[0014] 作为改进的是,所述应用的检测限为6μM。
[0015] 有益效果:
[0016] 与现有技术相比,本发明一种铜金铂复合纳米材料的制备方法及其在检测半胱氨酸上的应用,提出的是一种利用三元复合金属纳米材料可视化检测半胱氨酸的方法,该制备方法简单,对设备要求低,制备得到的铜金铂复合纳米材料具有过氧化物酶样活性,能够使TMB(3,3',5,5'‑四甲基联苯胺)和双氧水体系显示蓝色,而半胱氨酸的加入,能够抑制这种活性,表现为体系颜色变浅。根据体系颜色的变化及紫外可见吸收的改变,便可以检测半胱氨酸浓度,在半胱氨酸检测上可操作性强,速度快,便于推广。

实施方案

[0020] 下面通过具体实施例对本发明作进一步详细介绍。
[0021] 实施例1
[0022] 一种铜金铂复合纳米材料的制备方法,包括以下步骤:
[0023] 步骤1,Cu@Au的制备
[0024] 向5 ml水中加入CuSO(4 50μl,0.1 M)和柠檬酸钠(50μl,0.1 M)的水溶液,然后加入1 ml新鲜的硼氢化钠溶液(3.8 mg/4 ml H2O),15分钟后,加入HAuCl4水溶液(50μl,0.1M),搅拌15‑25分钟后,置于12‑16℃下储存24小时,即得铜/金复合纳米材料Cu@AuNPs,放入冰箱中避光冷藏备用;
[0025] 步骤2,Cu@Au/Pt的制备
[0026] 取2ml上述制备的Cu@AuNPs,加至5ml 1.0 mM的K2PtCl6溶液中,边搅拌边加热至80℃后,再逐滴加入5ml 浓度为5mM的 L‑ascorbic acid(抗坏血酸),继续搅拌30min,即得铜金铂复合纳米材料。
[0027] 实施例2 pH值对铜金铂复合纳米材料的过氧化物酶样活性的影响
[0028] pH 范围为3.6‑5.6,从上述实验可以看出,当pH 为3.8时,过氧化物酶样的活性最强。
[0029] 实施例3 H2O2的浓度对铜金铂复合纳米材料的过氧化物酶样活性的影响
[0030] H2O2的浓度分别为0,1 mM,2 mM,3 mM,4 mM,5 mM,8 mM,10 mM,15 mM,20 mM,30 mM,40 mM。
[0031] 从上述实验可以看出,H2O2的浓度为20mM,过氧化物酶样的活性最强。
[0032] 实施例4温度对铜金铂复合纳米材料的过氧化物酶样活性的影响
[0033] 温度分别为20℃,30℃,40℃,50℃,60,70,80,90℃,
[0034] 从上述实验可以看出,温度为30℃,过氧化物酶样的活性最强。
[0035] 实施例5 TMB浓度对铜金铂复合纳米材料的过氧化物酶样活性的影响
[0036] TMB浓度分别为0,0.1 mM,0.5 mM,1 mM,1.5 mM,3 mM,5 mM,8 mM,10 mM,20 mM,30 mM,50 mM。
[0037] 从上述实验可以看出,当TMB浓度为20mM,过氧化物酶样活性最强。
[0038] 实施例6
[0039] 将100μl不同浓度的半胱氨酸加到Cu@Au/Pt +TMB+H2O2体系中,该体系中Cu@Au/Pt (100μl),TMB(100μl),H2O(2 100μl),醋酸钠缓冲溶液(100μl,50mM),在水浴中反应一段时间后,观察体系的颜色变化,如图2(a)所示。从图2(b)中可以看出,体系的颜色随着半胱氨酸浓度的增加,逐渐变淡,吸收光谱图中吸收值随着半胱氨酸浓度的升高而降低。从图2(c)中可以看出,检测限为6μM,检测范围0‑3 mM。
[0040] 按照上述的步骤,将不同浓度的半胱氨酸换为同浓度的不同种氨基酸,观察在波长为625nm处各体系吸收值的变化。从图3中标号1‑18依次为水、半胱氨酸、亮氨酸、酪氨酸、丙氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、色氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、精氨酸、苏氨酸、苯基丙氨酸、脯氨酸、精氨酸盐酸盐、甘氨酸、谷氨酰胺、组氨酸,从图中可以看出只有半胱氨酸能最大程度抑制复合纳米材料的过氧化物酶样活性,所以,该复合纳米材料可选择性检测半胱氨酸。
[0041] 以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,本发明的保护范围不限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,可显而易见地得到的技术方案的简单变化或等效替换均落入本发明的保护范围内。

附图说明

[0017] 图1为添加Cu@Au/Pt前后的TMB+H2O2体系变化图,(a)为颜色变化图;(b)TMB+H2O2体系吸收光谱图;
[0018] 图2为不同浓度的半胱氨酸加入TMB+H2O2后体系变化图,(a)为颜色变化图;(b)不同浓度的半胱氨酸体系下的吸收光谱图,线条自上而下表示半胱氨酸的浓度依次升高;(c)在波长为652nm处不同浓度的半胱氨酸体系下的吸收值;
[0019] 图3为在波长为652nm处不同氨基酸加入TMB+H2O2后体系吸收值的变化。
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