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紫茎栽培苗快速繁育方法 0 0

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申请进展

基本信息

申请人信息

代理人信息

摘要

法律状态

权利要求

说明书

专利申请流程有哪些步骤？

申请

申请号：指国家知识产权局受理一件专利申请时给予该专利申请的一个标示号码。唯一性原则。

申请日：提出专利申请之日。

2016-05-27

申请公布

申请公布指发明专利申请经初步审查合格后，自申请日（或优先权日）起18个月期满时的公布或根据申请人的请求提前进行的公布。

申请公布号：专利申请过程中，在尚未取得专利授权之前，国家专利局《专利公报》公开专利时的编号。

申请公布日：申请公开的日期，即在专利公报上予以公开的日期。

2016-11-23

授权

授权指对发明专利申请经实质审查没有发现驳回理由，授予发明专利权；或对实用新型或外观设计专利申请经初步审查没有发现驳回理由，授予实用新型专利权或外观设计专利权。

2018-08-10

预估到期

发明专利权的期限为二十年，实用新型专利权期限为十年，外观设计专利权期限为十五年，均自申请日起计算。专利届满后法律终止保护。

2036-05-27

基本信息

有效性	有效专利	专利类型	发明专利
申请号	CN201610362923.0	申请日	2016-05-27
公开/公告号	CN106035079B	公开/公告日	2018-08-10
授权日	2018-08-10	预估到期日	2036-05-27
申请年	2016年	公开/公告年	2018年
缴费截止日
分类号	A01H4/00 、A01G17/00 、A01G24/25 、A01G24/23 、A01G24/15 、A01G24/20 、A01G24/22 、A01G24/10 、A01C1/00 、A01C1/08 、A01N65/44 、A01P1/00 、A01P3/00	主分类号	A01H4/00
是否联合申请	独立申请	文献类型号	B
独权数量	1	从权数量	6
权利要求数量	7	非专利引证数量	0
引用专利数量	0	被引证专利数量	0
非专利引证
引用专利		被引证专利
专利权维持	6	专利申请国编码	CN
专利事件		事务标签	公开、实质审查、授权

申请人信息

申请人	陈思	第一申请人	陈思
专利权人	陈思	当前专利权人	陈思
发明人	陈思	第一发明人	陈思
地址	广西壮族自治区南宁市兴宁区昆仑大道8号	邮编	530002
申请人数量	1	发明人数量	1
申请人所在省	广西壮族自治区	申请人所在市	广西壮族自治区南宁市

代理人信息

代理机构

专利代理机构是经省专利管理局审核，国家知识产权局批准设立，可以接受委托人的委托，在委托权限范围内以委托人的名义办理专利申请或其他专利事务的服务机构。

北京远大卓悦知识产权代理事务所

代理人

专利代理师是代理他人进行专利申请和办理其他专利事务，取得一定资格的人。

靳浩

摘要

本发明提供一种紫茎栽培苗快速繁育方法，包括种子选择与消毒、无菌苗培养、丛生芽诱导、生根培养、壮苗培养和苗床培养等步骤。与紫茎传统育苗方法相比，本发明的方法所需紫茎种子少，可短时大量繁殖并保持紫茎的优良遗传性状，幼苗品质好，畸形苗率低，幼苗成活率高达95％，栽培苗野外移栽成活率高达80％，可实现紫茎苗木的规模化生产和野外大面积育林生长，并为紫茎这一珍稀濒危植物的有效保护提供技术支持。

摘要附图
说明书附图：图1

法律状态

序号	法律状态公告日	法律状态	法律状态信息
1	2018-08-10	授权
2	2016-11-23	实质审查的生效	IPC(主分类): A01H 4/00 专利申请号: 201610362923.0 申请日: 2016.05.27
3	2016-10-26	公开

权利要求

权利要求书是申请文件最核心的部分，是申请人向国家申请保护他的发明创造及划定保护范围的文件。

1.一种紫茎栽培苗快速繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：
A、从壮健的紫茎母树上采种，将所得的紫茎种子置于含100g/L的牛奶树汁液的水溶液中于30℃下浸泡24-36h后，取出，用线状自来水冲洗干净后，再将所述紫茎种子放入天然消毒液中浸泡30min，最后将所述紫茎种子用无菌水冲洗3-5次并用消毒滤纸除去其表面水分，得外植体，其中，
所述天然消毒液的制备方法为：将8-10重量份代代、8-10重量份白千层、8-10重量份蓝桉、7-9重量份菖蒲、4-6重量份柠檬草和4-6重量份丁香粉碎至50-100目，加入500重量份的水室温下浸泡1h，再于60℃下真空回流提取2-4h，过滤，得滤液，再向所述滤液中加入15-18重量份的竹醋液，混合均匀后即得所述天然消毒液；
所述牛奶树汁液是将牛奶树的树皮用刀割开后，得到的白色汁液；
B、将步骤A中得到的所述外植体置于无菌苗培养基中，于22-26℃，第一光照条件下培养15-18天，得无菌苗，其中，
所述无菌苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括1.5-2.0mg/L GA3，1.0-1.5mg/L
6-BA，1.0-1.5mg/L 2，4-D，10-15g/L牛奶树汁液，30g/L 蔗糖和6g/L琼脂，pH值为5.8-6.0；
第一光照条件下培养时，光照强度为2000-2200lux，光照时间为14-16h/天；
C、将步骤B中得到的所述无菌苗用无菌解剖刀切割成0.8-1cm的小段并分别转接到丛生芽诱导培养基中，于22-26℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养28-30天，得丛生芽，其中，
所述丛生芽诱导培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.0-2.5mg/L ZT，1.0-
1.5mg/L 6-KT，1.0-1.5mg/L 2.4.5-T，0.8-1.0mg/L NAA，15-20g/L蛋黄液，4-6g/L大豆肽，
30g/L蔗糖和5g/L琼脂，pH值为5.5-5.8；
D、将步骤C中得到的所述丛生芽转接到生根养基中，于22-26℃，黑暗条件下培养6天后，转入第二光照条件下培养18-20天，得完整植株，其中，
所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，还包括1.2-1.5mg/L NAA，0.8-
1.0mg/L IBA，0.8-1.0mg/L多效唑，1-3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.5-5.8；
第二光照条件下培养时，光照强度2200-2400lux，光照时间为14-16h/天；
E、向所述生根培养基中加入0.5cm厚的无菌水，敞口培养7天后，将所述完整植株取出，转入壮苗培养基中，第三光照条件下培养28-30天，得幼苗，其中，
所述壮苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括2.0-2.5mg/L IBA，1.5-1.8mg/L ZT，0.8-1.0mg/L 6-BA，0.8-1.0mg/L多效唑，20-25g/L蛋黄液，3-5g/L活性炭，30g/L蔗糖和
10g/L琼脂，pH值为5.5-5.8；
第三光照条件下培养时，光照强度2200-2400lux，光照时间为14-16h/天，光照时培养温度为22-26℃，非光照时培养温度为16-20℃；
F、将步骤E中得到的所述幼苗移栽到苗床中继续培养5-6个月，得紫茎栽培苗，最后将所述紫茎栽培苗进行野外移栽。

2.如权利要求1所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，其特征在于，苗床中培养时，培养温度为16-20℃、湿度为70-80％、阴蔽度为20-30％。

3.如权利要求2所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，其特征在于，所述苗床由床体和基质组成，其中，所述床体，其包括：
床架，其为上表面开口的中空长方体，其长为3-9m、宽为1-1.8m、高为20-25cm；所述床架的平行于长度方向的右侧面和与其相邻的前侧面、后侧面及底面可拆卸连接；所述右侧面的下方设有与竖直方向呈30-60°的向下倾斜的滑槽，所述滑槽与所述底面边缘固定连接；
喷雾装置，其包括间隔设置在所述床架的内部上方并与所述床架的长度方向平行的多个进水管和间隔设置在所述进水管上的多个旋转喷头；
温控装置，其为设置在所述床架的内部下方的呈波浪形排列的热交换管；
自动控制系统，其包括设置在所述床架的内部的多个温湿度传感器和设置在所述前侧面的外表面上的控制面板。

4.如权利要求1所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，其特征在于，所述无菌苗培养基中GA3浓度为1.8mg/L，6-BA浓度为1.2mg/L，2，4-D浓度为1.2mg/L，牛奶树汁液浓度为12g/L，pH值为5.8。

5.如权利要求1所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，其特征在于，所述丛生芽诱导培养基中ZT浓度为2.2mg/L，6-KT浓度为1.2mg/L，2.4.5-T浓度为1.2mg/L，NAA浓度为0.9mg/L，蛋黄液浓度为18g/L，大豆肽浓度为5g/L，pH值为5.8。

6.如权利要求1所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，其特征在于，所述生根培养基中NAA 浓度为1.3mg/L，IBA浓度为0.9mg/L，多效唑浓度为0.9mg/L，大豆肽浓度为2/L，pH值为5.8。

7.如权利要求1所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，其特征在于，所述壮苗培养基中IBA浓度为2.2mg/L，ZT浓度为1.7mg/L，6-BA浓度为0.9mg/L，多效唑浓度为0.9mg/L，蛋黄液浓度为23g/L，活性炭浓度为4g/L，pH值为5.8。

说明书

技术领域

[0001] 本发明属于植物繁殖技术领域，具体涉及一种紫茎栽培苗快速繁育方法。

背景技术

[0002] 紫茎(拉丁学名：Stewartia sinensis Rehd.et Wils.)属山茶科紫茎属多年生木本植物。由于植被不断被破坏，天然更新力差，紫茎植株已日益减少，在中国红皮书被列为
“渐危种”。紫茎为中国特有的残遗植物，对研究东亚-北美植物区系有科学意义，其树皮片
状脱裂，内皮棕黄光洁，斑驳奇丽，花白瓣黄蕊，清秀淡雅，常用于装饰庭院；材质坚重，经久
耐用色美丽，为制造家具有优良用材；根皮、茎皮、果可入药；种子油可食用或制肥皂及润滑
油，故紫茎具有较高的经济价值，尤其是随着人们生活水平的提升，对物质的追求也不断的
提升，用紫茎装饰庭院，以紫茎这一优质而又美观的木材制作的家具，也会得到越来越多的
人士的青睐，其市场前景广阔。

[0003] 紫茎在自然状况下以种子进行繁殖，由于受到种子数量和种子发芽率的限制，不能实现苗木规模化生产，且采用种子培育的实生苗木性状差异大，不适合大面积育林生长。
组织培养是一种植株快速繁殖技术，其所需植株原材料少，不受生长季节限制，培养周期
短，变异低，可保持母本的优良遗传特性，可用于拯救濒危珍稀植物，解决其无法短时大量
繁殖的难题，实现模化生产。但目前关于紫茎的组织培养研究还未见报道。

发明内容

[0004] 本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。

[0005] 本发明还有一个目的是提供一种紫茎栽培苗快速繁育方法，利用紫茎种子进行组织培养，获得紫茎幼苗，并将幼苗移栽到苗床中继续培养获得紫茎栽培苗，该繁育方法所需
紫茎种子少，可有效提高紫茎的繁育系数，保留紫茎的优良遗传特性，幼苗成活率高达
95％，栽培苗野外移栽成活率高达80％，可实现紫茎苗木的规模化生产和野外大面积育林
生长，有利于紫茎这一珍稀濒危植物的有效保护。

[0006] 本发明还有一个目的是提供一种紫茎栽培苗快速繁育方法，包括以下步骤：

[0007] A、从壮健的紫茎母树上采种，将所得的紫茎种子置于含100g/L的牛奶树汁液的水溶液中于30℃下浸泡24-36h后，取出，用线状自来水冲洗干净后，再将所述紫茎种子放入天
然消毒液中浸泡30min，最后将所述紫茎种子用无菌水冲洗3-5次并用消毒滤纸除去其表面
水分，得外植体，其中，

[0008] 所述天然消毒液的制备方法为：将8-10重量份代代、8-10重量份白千层、8-10重量份蓝桉、7-9重量份菖蒲、4-6重量份柠檬草和4-6重量份丁香粉碎至50-100目，加入500重量
份的水室温下浸泡1h，再于60℃下真空回流提取2-4h，过滤，得滤液，再向所述滤液中加入
15-18重量份的竹醋液，混合均匀后即得所述天然消毒液；

[0009] 所述牛奶树汁液是将牛奶树的树皮用刀割开后，得到的白色汁液；

[0010] B、将步骤A中得到的所述外植体置于无菌苗培养基中，于22-26℃，第一光照条件下培养15-18天，得无菌苗，其中，

[0011] 所述无菌苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括1.5-2.0mg/L GA3(赤霉素)，1.0-1.5mg/L 6-BA(6-苄氨基嘌呤)，1.0-1.5mg/L 2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸)，10-
15g/L牛奶树汁液，30g/L蔗糖和6g/L琼脂，pH值为5.8-6.0；

[0012] 第一光照条件下培养时，光照强度为2000-2200lux，光照时间为14-16h/天；

[0013] C、将步骤B中得到的所述无菌苗用无菌解剖刀切割成0.8-1cm的小段并分别转接到丛生芽诱导培养基中，于22-26℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养28-
30天，得丛生芽，其中，

[0014] 所述丛生芽诱导培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.0-2.5mg/L ZT(玉米素)，1.0-1.5mg/L 6-KT(激动素)，1.0-1.5mg/L 2.4.5-T(2，4，5-三氯苯氧乙酸)，
0.8-1.0mg/L NAA(α-萘乙酸)，15-20g/L蛋黄液，4-6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和5g/L琼脂，pH
值为5.5-5.8；

[0015] 所述蛋黄液是取新鲜蛋黄，经充分搅拌后，用80目滤布过滤制得；

[0016] D、将步骤C中得到的所述丛生芽转接到生根养基中，于22-26℃，黑暗条件下培养6天后，转入第二光照条件下培养18-20天，得完整植株，其中，

[0017] 所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，还包括1.2-1.5mg/L NAA，0.8-1.0mg/L IBA(吲哚丁酸)，0.8-1.0mg/L多效唑，1-3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值
为5.5-5.8；

[0018] 第二光照条件下培养时，光照强度2200-2400lux，光照时间为14-16h/天；

[0019] E、向所述生根培养基中加入0.5cm厚的无菌水，敞口培养7天后，将所述完整植株取出，转入壮苗培养基中，第三光照条件下培养28-30天，得幼苗，其中，

[0020] 所述壮苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括2.0-2.5mg/L IBA，1.5-1.8mg/L ZT，0.8-1.0mg/L 6-BA，0.8-1.0mg/L多效唑，20-25g/L蛋黄液，3-5g/L活性炭，
30g/L蔗糖和10g/L琼脂，pH值为5.5-5.8；

[0021] 第三光照条件下培养时，光照强度2200-2400lux，光照时间为14-16h/天，光照时培养温度为22-26℃，非光照时培养温度为16-20℃；

[0022] F、将步骤E中得到的所述幼苗移栽到苗床中继续培养5-6个月，得紫茎栽培苗，最后将所述紫茎栽培苗进行野外移栽。

[0023] 优选的是，所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，苗床中培养时，培养温度为16-20℃、湿度为70-80％、阴蔽度为20-30％。

[0024] 优选的是，所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述苗床由床体和基质组成，其中，所述床体，其包括：

[0025] 床架，其为上表面开口的中空长方体，其长为3-9m、宽为1-1.8m、高为20-25cm；所述床架的平行于长度方向的右侧面和与其相邻的前侧面、后侧面及底面可拆卸连接；所述
右侧面的下方设有与竖直方向呈30-60°的向下倾斜的滑槽，所述滑槽与所述底面边缘固定
连接；

[0026] 喷雾装置，其包括间隔设置在所述床架的内部上方并与所述床架的长度方向平行的多个进水管和间隔设置在所述进水管上的多个旋转喷头；

[0027] 温控装置，其为设置在所述床架的内部下方的呈波浪形排列的热交换管；

[0028] 自动控制系统，其包括设置在所述床架的内部的多个温湿度传感器和设置在所述前侧面的外表面上的控制面板。

[0029] 优选的是，所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述基质，其包括：

[0030] 第一基质层，其由15-20重量份稻壳、15-20重量份珍珠岩和10-12重量份锯末经高温灭菌制得，其厚度为6-8cm；

[0031] 第二基质层，其位于所述第一基质层上方，其由20-30重量份厩肥、15-20重量份废蜜液、15-20份蛋壳、10-15重量份豆渣、10-15重量份秸秆和0.8-1份酵素菌经发酵后再加入
40-50重量份黄壤土混合制得，其厚度为13-15cm；

[0032] 第三基质层，其位于所述第二基质层上方，其为厚度为1-2cm的表层腐殖土。

[0033] 优选的是，所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述无菌苗培养基中GA3浓度为1.8mg/L，6-BA浓度为1.2mg/L，2，4-D浓度为1.2mg/L，牛奶树汁液浓度为12g/L，pH值为5.8。

[0034] 优选的是，所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述丛生芽诱导培养基中ZT浓度为2.2mg/L，6-KT浓度为1.2mg/L，2.4.5-T浓度为1.2mg/L，NAA浓度为0.9mg/L，蛋黄液浓度为
18g/L，大豆肽浓度为5g/L，pH值为5.8。

[0035] 优选的是，所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述生根培养基中NAA浓度为1.3mg/L，IBA浓度为0.9mg/L，多效唑浓度为0.9mg/L，大豆肽浓度为2/L，pH值为5.8。

[0036] 优选的是，所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述壮苗培养基中IBA浓度为2.2mg/L，ZT浓度为1.7mg/L，6-BA浓度为0.9mg/L，多效唑浓度为0.9mg/L，蛋黄液浓度为23g/L，活
性炭浓度为4g/L，pH值为5.8。

[0037] 本发明至少包括以下有益效果：

[0038] 第一、与紫茎传统育苗方法相比，本发明的方法所需紫茎种子少，可短时大量繁殖并保持紫茎的优良遗传性状，幼苗品质好，畸形苗率低，幼苗成活率高达95％，栽培苗野外
移栽成活率高达80％，可实现紫茎苗木的规模化生产和野外大面积育林生长，并为紫茎这
一珍稀濒危植物的有效保护提供技术支持；

[0039] 第二、将紫茎种子用牛奶树汁液浸泡，一方面可使紫茎种子充分吸水，促进种子复苏，另一方面牛奶树汁液中的活性成分可激发紫茎种子内酶和生长激素的活性，诱导紫茎
种子快速萌发；

[0040] 第三、将具有一定消毒杀菌作用的中草药代代、白千层、蓝桉、菖蒲、柠檬草和丁香进行配伍，通过真空回流提取其有效成分，过滤，将所得滤液与竹醋液混合制备成天然消毒
液并对紫茎新梢进行消毒处理，该消毒方法可避免传统的酒精和升汞消毒法对紫茎种子的
损害，降低组织培养过程中产生畸形苗的概率；

[0041] 第四、通过将GA3、6-BA、2，4-D和牛奶树汁液以适宜的比例加入MS培养基中制备无菌苗培养基，GA3和牛奶树汁液可产生协同作用，共同促进紫茎种子的萌发，牛奶树汁液中
的蛋白质、氨基酸和矿物质还可为无菌苗的生长提供必须的营养物质，6-BA和2，4-D可促进
紫茎种子萌发后根系和茎叶的生长或伸展，以使获得的无菌苗植株健壮；

[0042] 第五、通过将ZT、6-KT、2.4.5-T、NAA、蛋黄液和大豆肽以适宜比例加入3/4MS培养基中制备丛生芽诱导培养基，ZT、6-KT、2.4.5-T、NAA和蛋黄液组合，可促进无菌苗小段中紫
茎细胞的增殖、分裂和分化，诱导丛生芽的形成，提高增殖效果，蛋黄液和大豆肽中的蛋白
质、小分子肽、游离氨基酸、糖类、磷脂类和微量元素等成分可进一步促进紫茎细胞的生长、
繁殖，培养28-30天即可得到健壮的丛生芽；

[0043] 第六、通过将NAA、IBA、多效唑和大豆肽以适宜的比例加入1/2MS培养基中制备生根培养基，可消除丛生芽的顶端优势，刺激丛生芽基部的细胞分裂，诱导生根，生根率高达
98％，且根系健壮发达；

[0044] 第七、通过将IBA、ZT、6-BA、多效唑、蛋黄液和活性炭以适宜的比例加入MS培养基中制备壮苗培养基，IBA、ZT、6-BA、多效唑和蛋黄液可有效促进紫茎植株根系和茎叶的生长
或伸展，活性炭的加入，可使生长调节剂IBA、ZT、6-BA和多效唑在壮苗培养过程中缓慢释
放，使紫茎植株在壮苗培养期内均健壮生长；

[0045] 第八、通过床体自动控制系统将苗床的温度和湿度控制在适宜范围，可避免传统大棚培养中温湿度控制不均的问题，提高紫茎幼苗的成活率；

[0046] 第九、根据紫茎幼苗的生长特点和营养需要配制专用的培养基质，基质中的第一基质层由稻壳、珍珠岩和锯末经杀菌制得，其疏松通气，吸水保水且不含病原菌；第二基质
层由厩肥、废蜜液、蛋壳、豆渣、秸秆和酵素菌经发酵后与黄壤土混合制得，其可为幼苗生长
提供丰富的易于吸收的营养，发酵还可使第二基质层中产生大量的有益细菌，可增强幼苗
的抗病虫害能力；第三基质层为表层腐殖土，可为幼苗生长提供一定营养并减缓第二基质
层中养分和水分的散失，确保幼苗在其上长势好，无病虫害，所得栽培苗健壮，提高了栽培
苗野外移栽的成活率，且移栽后长势好。

[0047] 本发明的其他优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

实施方案

[0050] 下面结合实施例和附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

[0051] 需要说明的是，下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得；在本发明的描述中，术语“横向”、“纵
向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，
并不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因
此不能理解为对本发明的限制。

[0052] 实施例1：

[0053] 一种紫茎栽培苗快速繁育方法，包括以下步骤：

[0054] A、从壮健的紫茎母树上采种，将所得的紫茎种子置于含100g/L的牛奶树汁液的水溶液中于30℃下浸泡24h后，取出，用线状自来水冲洗干净后，再将所述紫茎种子放入天然
消毒液中浸泡30min，最后将所述紫茎种子用无菌水冲洗3次并用消毒滤纸除去其表面水
分，得外植体，其中，

[0055] 所述天然消毒液的制备方法为：将8重量份代代、8重量份白千层、8重量份蓝桉、7重量份菖蒲、4重量份柠檬草和4重量份丁香粉碎至50目，加入500重量份的水室温下浸泡
1h，再于60℃下真空回流提取2h，过滤，得滤液，再向所述滤液中加入15重量份的竹醋液，混
合均匀后即得所述天然消毒液；

[0056] 所述牛奶树汁液是将牛奶树的树皮用刀割开后，得到的白色汁液；

[0057] B、将步骤A中得到的所述外植体置于无菌苗培养基中，于22℃，第一光照条件下培养15天，得无菌苗，其中，

[0058] 所述无菌苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括1.5mg/L GA3，1.0mg/L 6-BA，1.0mg/L 2，4-D，10g/L牛奶树汁液，30g/L蔗糖和6g/L琼脂，pH值为5.8；

[0059] 第一光照条件下培养时，光照强度为2000lux，光照时间为14h/天；

[0060] C、将步骤B中得到的所述无菌苗用无菌解剖刀切割成0.8cm的小段并分别转接到丛生芽诱导培养基中，于22℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养28天，得丛
生芽，其中，

[0061] 所述丛生芽诱导培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.0mg/L ZT，1.0mg/L 6-KT，1.0mg/L 2.4.5-T，0.8mg/L NAA，15g/L蛋黄液，4g/L大豆肽，30g/L蔗糖和
5g/L琼脂，pH值为5.5；

[0062] D、将步骤C中得到的所述丛生芽转接到生根养基中，于22℃，黑暗条件下培养6天后，转入第二光照条件下培养18天，得完整植株，其中，

[0063] 所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，还包括1.2mg/L NAA，0.8mg/L IBA，0.8mg/L多效唑，1g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.5；

[0064] 第二光照条件下培养时，光照强度2200lux，光照时间为14h/天；

[0065] E、向所述生根培养基中加入0.5cm厚的无菌水，敞口培养7天后，将所述完整植株取出，转入壮苗培养基中，第三光照条件下培养28天，得幼苗，其中，

[0066] 所述壮苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括2.0mg/L IBA，1.5mg/L ZT，0.8mg/L 6-BA，0.8mg/L多效唑，20g/L蛋黄液，3g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L琼脂，pH值为
5.5；

[0067] 第三光照条件下培养时，光照强度2200lux，光照时间为14h/天，光照时培养温度为22℃，非光照时培养温度为16℃；

[0068] F、将步骤E中得到的所述幼苗移栽到苗床中继续培养5个月，得紫茎栽培苗，最后将所述紫茎栽培苗进行野外移栽。

[0069] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，苗床中培养时，培养温度为16℃、湿度为70％、阴蔽度为20％。

[0070] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述苗床由床体和基质组成，其中，所述床体如图1所示，其包括：

[0071] 床架1，其为上表面开口的中空长方体，其长为3m、宽为1m、高为20cm；所述床架1的平行于长度方向的右侧面11和与其相邻的前侧面12、后侧面13及底面14可拆卸连接；所述
右侧面11的下方设有与竖直方向呈60°的向下倾斜的滑槽15，所述滑槽15与所述底面14边
缘固定连接；喷雾装置，其包括间隔设置在所述床架的内部上方并与所述床架的长度方向
平行的多个进水管2和间隔设置在所述进水管上的多个旋转喷头3；温控装置，其为设置在
所述床架的内部下方的呈波浪形排列的热交换管4；自动控制系统，其包括设置在所述床架
的内部的多个温湿度传感器5和设置在所述前侧面的外表面上的控制面板6。

[0072] 所述床架自动控温控湿的工作原理为，温湿度传感器将采集到的温湿度信息传递给控制面板，控制面板通过比对程序与设定值进行对比，当测定值与设定值不相等时，控制
面板则通过控制程序控制热交换管和喷雾装置工作，直至测定值与设定值相等时，控制面
板则通过控制程序控制热交换管和喷雾装置停止工作。

[0073] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述基质，其包括：

[0074] 第一基质层，其由15重量份稻壳、15重量份珍珠岩和10重量份锯末经高温灭菌制得，其厚度为6cm；

[0075] 第二基质层，其位于所述第一基质层上方，其由20重量份厩肥、15重量份废蜜液、15份蛋壳、10重量份豆渣、10重量份秸秆和0.8份酵素菌经发酵后再加入40重量份黄壤土混
合制得，其厚度为13cm；

[0076] 第三基质层，其位于所述第二基质层上方，其为厚度为1cm的表层腐殖土。

[0077] 实施例2：

[0078] 一种紫茎栽培苗快速繁育方法，包括以下步骤：

[0079] A、从壮健的紫茎母树上采种，将所得的紫茎种子置于含100g/L的牛奶树汁液的水溶液中于30℃下浸泡30h后，取出，用线状自来水冲洗干净后，再将所述紫茎种子放入天然
消毒液中浸泡30min，最后将所述紫茎种子用无菌水冲洗4次并用消毒滤纸除去其表面水
分，得外植体，其中，

[0080] 所述天然消毒液的制备方法为：将9重量份代代、9重量份白千层、9重量份蓝桉、8重量份菖蒲、5重量份柠檬草和5重量份丁香粉碎至80目，加入500重量份的水室温下浸泡
1h，再于60℃下真空回流提取3h，过滤，得滤液，再向所述滤液中加入16重量份的竹醋液，混
合均匀后即得所述天然消毒液；

[0081] 所述牛奶树汁液是将牛奶树的树皮用刀割开后，得到的白色汁液；

[0082] B、将步骤A中得到的所述外植体置于无菌苗培养基中，于25℃，第一光照条件下培养16天，得无菌苗，其中，

[0083] 所述无菌苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括1.8mg/L GA3，1.2mg/L 6-BA，1.2mg/L 2，4-D，12g/L牛奶树汁液，30g/L蔗糖和6g/L琼脂，pH值为5.8；

[0084] 第一光照条件下培养时，光照强度为2100lux，光照时间为15h/天；

[0085] C、将步骤B中得到的所述无菌苗用无菌解剖刀切割成0.9cm的小段并分别转接到丛生芽诱导培养基中，于25℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养29天，得丛
生芽，其中，

[0086] 所述丛生芽诱导培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.2mg/L ZT，1.2mg/L 6-KT，1.2mg/L 2.4.5-T，0.9mg/L NAA，18g/L蛋黄液，5g/L大豆肽，30g/L蔗糖和
5g/L琼脂，pH值为5.8；

[0087] D、将步骤C中得到的所述丛生芽转接到生根养基中，于25℃，黑暗条件下培养6天后，转入第二光照条件下培养19天，得完整植株，其中，

[0088] 所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，还包括1.3mg/L NAA，0.9mg/L IBA，0.9mg/L多效唑，2g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.8；

[0089] 第二光照条件下培养时，光照强度2300lux，光照时间为15h/天；

[0090] E、向所述生根培养基中加入0.5cm厚的无菌水，敞口培养7天后，将所述完整植株取出，转入壮苗培养基中，第三光照条件下培养29天，得幼苗，其中，

[0091] 所述壮苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括2.2mg/L IBA，1.7mg/L ZT，0.9mg/L 6-BA，0.9mg/L多效唑，23g/L蛋黄液，4g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L琼脂，pH值为
5.8；

[0092] 第三光照条件下培养时，光照强度2300lux，光照时间为15h/天，光照时培养温度为26℃，非光照时培养温度为16℃；

[0093] F、将步骤E中得到的所述幼苗移栽到苗床中继续培养6个月，得紫茎栽培苗，最后将所述紫茎栽培苗进行野外移栽。

[0094] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，苗床中培养时，培养温度为18℃、湿度为75％、阴蔽度为25％。

[0095] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述苗床由床体和基质组成，其中，所述床体如图1所示，其包括：

[0096] 床架1，其为上表面开口的中空长方体，其长为6m、宽为1.5m、高为22cm；所述床架1的平行于长度方向的右侧面11和与其相邻的前侧面12、后侧面13及底面14可拆卸连接；所
述右侧面11的下方设有与竖直方向呈60°的向下倾斜的滑槽15，所述滑槽15与所述底面14
边缘固定连接；喷雾装置，其包括间隔设置在所述床架的内部上方并与所述床架的长度方
向平行的多个进水管2和间隔设置在所述进水管上的多个旋转喷头3；温控装置，其为设置
在所述床架的内部下方的呈波浪形排列的热交换管4；自动控制系统，其包括设置在所述床
架的内部的多个温湿度传感器5和设置在所述前侧面的外表面上的控制面板6。

[0097] 所述床架自动控温控湿的工作原理为，温湿度传感器将采集到的温湿度信息传递给控制面板，控制面板通过比对程序与设定值进行对比，当测定值与设定值不相等时，控制
面板则通过控制程序控制热交换管和喷雾装置工作，直至测定值与设定值相等时，控制面
板则通过控制程序控制热交换管和喷雾装置停止工作。

[0098] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述基质，其包括：

[0099] 第一基质层，其由18重量份稻壳、18重量份珍珠岩和11重量份锯末经高温灭菌制得，其厚度为7cm；

[0100] 第二基质层，其位于所述第一基质层上方，其由25重量份厩肥、18重量份废蜜液、18份蛋壳、13重量份豆渣、13重量份秸秆和0.9份酵素菌经发酵后再加入45重量份黄壤土混
合制得，其厚度为13cm；

[0101] 第三基质层，其位于所述第二基质层上方，其为厚度为2cm的表层腐殖土。

[0102] 实施例3：

[0103] 一种紫茎栽培苗快速繁育方法，包括以下步骤：

[0104] A、从壮健的紫茎母树上采种，将所得的紫茎种子置于含100g/L的牛奶树汁液的水溶液中于30℃下浸泡36h后，取出，用线状自来水冲洗干净后，再将所述紫茎种子放入天然
消毒液中浸泡30min，最后将所述紫茎种子用无菌水冲洗5次并用消毒滤纸除去其表面水
分，得外植体，其中，

[0105] 所述天然消毒液的制备方法为：将10重量份代代、10重量份白千层、10重量份蓝桉、9重量份菖蒲、6重量份柠檬草和6重量份丁香粉碎至100目，加入500重量份的水室温下
浸泡1h，再于60℃下真空回流提取4h，过滤，得滤液，再向所述滤液中加入18重量份的竹醋
液，混合均匀后即得所述天然消毒液；

[0106] 所述牛奶树汁液是将牛奶树的树皮用刀割开后，得到的白色汁液；

[0107] B、将步骤A中得到的所述外植体置于无菌苗培养基中，于26℃，第一光照条件下培养18天，得无菌苗，其中，

[0108] 所述无菌苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括2.0mg/L GA3，1.5mg/L 6-BA，1.5mg/L 2，4-D，15g/L牛奶树汁液，30g/L蔗糖和6g/L琼脂，pH值为6.0；

[0109] 第一光照条件下培养时，光照强度为2200lux，光照时间为16h/天；

[0110] C、将步骤B中得到的所述无菌苗用无菌解剖刀切割成1cm的小段并分别转接到丛生芽诱导培养基中，于26℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养30天，得丛生
芽，其中，

[0111] 所述丛生芽诱导培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.5mg/L ZT，1.5mg/L 6-KT，1.5mg/L 2.4.5-T，1.0mg/L NAA，20g/L蛋黄液，6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和
5g/L琼脂，pH值为5.8；

[0112] D、将步骤C中得到的所述丛生芽转接到生根养基中，于26℃，黑暗条件下培养6天后，转入第二光照条件下培养20天，得完整植株，其中，

[0113] 所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，还包括1.5mg/L NAA，1.0mg/L IBA，1.0mg/L多效唑，3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.8；

[0114] 第二光照条件下培养时，光照强度2400lux，光照时间为16h/天；

[0115] E、向所述生根培养基中加入0.5cm厚的无菌水，敞口培养7天后，将所述完整植株取出，转入壮苗培养基中，第三光照条件下培养30天，得幼苗，其中，

[0116] 所述壮苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括2.5mg/L IBA，1.8mg/L ZT，1.0mg/L 6-BA，1.0mg/L多效唑，25g/L蛋黄液，5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L琼脂，pH值为
5.8；

[0117] 第三光照条件下培养时，光照强度2400lux，光照时间为16h/天，光照时培养温度为26℃，非光照时培养温度为20℃；

[0118] F、将步骤E中得到的所述幼苗移栽到苗床中继续培养5.5个月，得紫茎栽培苗，最后将所述紫茎栽培苗进行野外移栽。

[0119] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，苗床中培养时，培养温度为20℃、湿度为80％、阴蔽度为30％。

[0120] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述苗床由床体和基质组成，其中，所述床体如图1所示，其包括：

[0121] 床架1，其为上表面开口的中空长方体，其长为9m、宽为1.8m、高为25cm；所述床架1的平行于长度方向的右侧面11和与其相邻的前侧面12、后侧面13及底面14可拆卸连接；所
述右侧面11的下方设有与竖直方向呈60°的向下倾斜的滑槽15，所述滑槽15与所述底面14
边缘固定连接；喷雾装置，其包括间隔设置在所述床架的内部上方并与所述床架的长度方
向平行的多个进水管2和间隔设置在所述进水管上的多个旋转喷头3；温控装置，其为设置
在所述床架的内部下方的呈波浪形排列的热交换管4；自动控制系统，其包括设置在所述床
架的内部的多个温湿度传感器5和设置在所述前侧面的外表面上的控制面板6。

[0122] 所述床架自动控温控湿的工作原理为，温湿度传感器将采集到的温湿度信息传递给控制面板，控制面板通过比对程序与设定值进行对比，当测定值与设定值不相等时，控制
面板则通过控制程序控制热交换管和喷雾装置工作，直至测定值与设定值相等时，控制面
板则通过控制程序控制热交换管和喷雾装置停止工作。

[0123] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述基质，其包括：

[0124] 第一基质层，其由20重量份稻壳、20重量份珍珠岩和12重量份锯末经高温灭菌制得，其厚度为8cm；

[0125] 第二基质层，其位于所述第一基质层上方，其由30重量份厩肥、20重量份废蜜液、20份蛋壳、15重量份豆渣、15重量份秸秆和1份酵素菌经发酵后再加入50重量份黄壤土混合
制得，其厚度为15cm；

[0126] 第三基质层，其位于所述第二基质层上方，其为厚度为2cm的表层腐殖土。

[0127] 实施例4：

[0128] 一种紫茎栽培苗快速繁育方法，包括以下步骤：

[0129] A、从壮健的紫茎母树上采种，将所得的紫茎种子置于含100g/L的牛奶树汁液的水溶液中于30℃下浸泡24h后，取出，用线状自来水冲洗干净后，再将所述紫茎种子放入天然
消毒液中浸泡30min，最后将所述紫茎种子用无菌水冲洗5次并用消毒滤纸除去其表面水
分，得外植体，其中，

[0130] 所述天然消毒液的制备方法为：将10重量份代代、9重量份白千层、9重量份蓝桉、9重量份菖蒲、5重量份柠檬草和5重量份丁香粉碎至100目，加入500重量份的水室温下浸泡
1h，再于60℃下真空回流提取3h，过滤，得滤液，再向所述滤液中加入17重量份的竹醋液，混
合均匀后即得所述天然消毒液；

[0131] 所述牛奶树汁液是将牛奶树的树皮用刀割开后，得到的白色汁液；

[0132] B、将步骤A中得到的所述外植体置于无菌苗培养基中，于24℃，第一光照条件下培养18天，得无菌苗，其中，

[0133] 所述无菌苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括2.0mg/L GA3，1.0mg/L 6-BA，1.0mg/L 2，4-D，15g/L牛奶树汁液，30g/L蔗糖和6g/L琼脂，pH值为5.9；

[0134] 第一光照条件下培养时，光照强度为2200lux，光照时间为16h/天；

[0135] C、将步骤B中得到的所述无菌苗用无菌解剖刀切割成1cm的小段并分别转接到丛生芽诱导培养基中，于24℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养30天，得丛生
芽，其中，

[0136] 所述丛生芽诱导培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.0mg/L ZT，1.5mg/L 6-KT，1.5mg/L 2.4.5-T，0.9mg/L NAA，20g/L蛋黄液，4g/L大豆肽，30g/L蔗糖和
5g/L琼脂，pH值为5.6；

[0137] D、将步骤C中得到的所述丛生芽转接到生根养基中，于24℃，黑暗条件下培养6天后，转入第二光照条件下培养20天，得完整植株，其中，

[0138] 所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，还包括1.5mg/L NAA，0.9mg/L IBA，0.9mg/L多效唑，3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.6；

[0139] 第二光照条件下培养时，光照强度2200lux，光照时间为16h/天；

[0140] E、向所述生根培养基中加入0.5cm厚的无菌水，敞口培养7天后，将所述完整植株取出，转入壮苗培养基中，第三光照条件下培养30天，得幼苗，其中，

[0141] 所述壮苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括2.5mg/L IBA，1.5mg/L ZT，0.8mg/L 6-BA，0.8mg/L多效唑，25g/L蛋黄液，5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L琼脂，pH值为
5.6；

[0142] 第三光照条件下培养时，光照强度2200lux，光照时间为14h/天，光照时培养温度为25℃，非光照时培养温度为20℃；

[0143] F、将步骤E中得到的所述幼苗移栽到苗床中继续培养6个月，得紫茎栽培苗，最后将所述紫茎栽培苗进行野外移栽。

[0144] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，苗床中培养时，培养温度为20℃、湿度为75％、阴蔽度为25％。

[0145] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述苗床由床体和基质组成，其中，所述床体如图1所示，其包括：

[0146] 床架1，其为上表面开口的中空长方体，其长为6m、宽为1.5m、高为25cm；所述床架1的平行于长度方向的右侧面11和与其相邻的前侧面12、后侧面13及底面14可拆卸连接；所
述右侧面11的下方设有与竖直方向呈60°的向下倾斜的滑槽15，所述滑槽15与所述底面14
边缘固定连接；喷雾装置，其包括间隔设置在所述床架的内部上方并与所述床架的长度方
向平行的多个进水管2和间隔设置在所述进水管上的多个旋转喷头3；温控装置，其为设置
在所述床架的内部下方的呈波浪形排列的热交换管4；自动控制系统，其包括设置在所述床
架的内部的多个温湿度传感器5和设置在所述前侧面的外表面上的控制面板6。

[0147] 所述床架自动控温控湿的工作原理为，温湿度传感器将采集到的温湿度信息传递给控制面板，控制面板通过比对程序与设定值进行对比，当测定值与设定值不相等时，控制
面板则通过控制程序控制热交换管和喷雾装置工作，直至测定值与设定值相等时，控制面
板则通过控制程序控制热交换管和喷雾装置停止工作。

[0148] 所述的紫茎栽培苗快速繁育方法，所述基质，其包括：

[0149] 第一基质层，其由20重量份稻壳、20重量份珍珠岩和10重量份锯末经高温灭菌制得，其厚度为8cm；

[0150] 第二基质层，其位于所述第一基质层上方，其由30重量份厩肥、15重量份废蜜液、20份蛋壳、15重量份豆渣、10重量份秸秆和1份酵素菌经发酵后再加入50重量份黄壤土混合
制得，其厚度为15cm；

[0151] 第三基质层，其位于所述第二基质层上方，其为厚度为2cm的表层腐殖土。

[0152] 对比例1：

[0153] 通过对比例1来进一步说明本发明天然消毒液的有益效果。其中，对照组的紫茎种子消毒采用传统酒精和升汞消毒法，对照组的其余操作条件同实施例2，实验结果见表1。

[0154] 表1 不同消毒方法对紫茎幼苗的影响

[0155]消毒方法增殖系数(倍) 畸形苗率(％)
天然消毒液消毒 5.0 0.2
酒精和升汞消毒 4.8 8

[0156] 由表1可知，消毒方法对紫茎幼苗的增殖系数影响不显著，但对畸形苗率有显著影响，采用天然消毒液的紫茎幼苗畸形苗率仅为0.2％，而采用酒精和升汞消毒法的紫茎幼苗
畸形率高达8％，说明天然消毒液消毒可显著降低紫茎幼苗的畸形苗率。

[0157] 尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用。它完全可以被适用于各种适合本发明的领域。对于熟悉本领域的人员而言，可容易地
实现另外的修改。因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限
于特定的细节和这里示出与描述的实例。

附图说明

[0048] 图1为本发明床体的结构示意图。

[0049] 其中，1、床架；11、右侧面；12、前侧面；13、后侧面；14、底面；15、滑槽；2、进水管；3、旋转喷头；4、热交换管；5、温湿度传感器；6、控制面板。

1利用甘薯愈伤组织繁殖培养和保存植物寄生线虫的方法