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一种烟梗微生物处理提香的方法   0    0

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专利申请流程有哪些步骤?
专利申请流程图
申请
申请号:指国家知识产权局受理一件专利申请时给予该专利申请的一个标示号码。唯一性原则。
申请日:提出专利申请之日。
2015-05-18
申请公布
申请公布指发明专利申请经初步审查合格后,自申请日(或优先权日)起18个月期满时的公布或根据申请人的请求提前进行的公布。
申请公布号:专利申请过程中,在尚未取得专利授权之前,国家专利局《专利公报》公开专利时的编号。
申请公布日:申请公开的日期,即在专利公报上予以公开的日期。
2015-10-14
授权
授权指对发明专利申请经实质审查没有发现驳回理由,授予发明专利权;或对实用新型或外观设计专利申请经初步审查没有发现驳回理由,授予实用新型专利权或外观设计专利权。
2016-08-31
预估到期
发明专利权的期限为二十年,实用新型专利权期限为十年,外观设计专利权期限为十五年,均自申请日起计算。专利届满后法律终止保护。
2035-05-18
基本信息
有效性 有效专利 专利类型 发明专利
申请号 CN201510249706.6 申请日 2015-05-18
公开/公告号 CN104905396B 公开/公告日 2016-08-31
授权日 2016-08-31 预估到期日 2035-05-18
申请年 2015年 公开/公告年 2016年
缴费截止日
分类号 A24B5/16 主分类号 A24B5/16
是否联合申请 独立申请 文献类型号 B
独权数量 1 从权数量 0
权利要求数量 1 非专利引证数量 0
引用专利数量 0 被引证专利数量 0
非专利引证
引用专利 被引证专利
专利权维持 5 专利申请国编码 CN
专利事件 转让 事务标签 公开、实质审查、申请权转移、授权、权利转移
申请人信息
申请人 第一申请人
专利权人 李淑兰 当前专利权人 江苏浩丰生物科技有限公司
发明人 潘高峰 第一发明人 潘高峰
地址 山东省青岛市李沧区大崂路1020号二单元302户 邮编 266000
申请人数量 1 发明人数量 1
申请人所在省 山东省 申请人所在市 山东省青岛市
代理人信息
代理机构
专利代理机构是经省专利管理局审核,国家知识产权局批准设立,可以接受委托人的委托,在委托权限范围内以委托人的名义办理专利申请或其他专利事务的服务机构。
代理人
专利代理师是代理他人进行专利申请和办理其他专利事务,取得一定资格的人。
摘要
本发明公开了一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于其步骤如下:取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的LB液体培养基中;培养后离心,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用无菌水振荡均匀,使用时稀释为处理用菌剂;取菌剂喷洒到梗丝上进行处理即可。
  • 摘要附图
    一种烟梗微生物处理提香的方法
法律状态
序号 法律状态公告日 法律状态 法律状态信息
1 2020-09-01 专利权的转移 登记生效日: 2020.08.12 专利权人由邳州奇威食品科技有限公司变更为江苏浩丰生物科技有限公司 地址由221000 江苏省徐州市邳州市宿羊山镇工业园区55号变更为226100 江苏省南通市海门市海门街道天久公路18号
2 2018-12-21 专利权人的姓名或者名称、地址的变更 专利权人由李淑兰变更为李淑兰 地址由516800 广东省惠州市龙门县产业转移工业园工业三路1号变更为210000 江苏省南京市鼓楼区中山北路105号中环国际广场
3 2016-08-31 授权
4 2016-08-03 专利申请权的转移 登记生效日: 2016.07.12 申请人由湖州品创孵化器有限公司变更为李淑兰 地址由313000 浙江省湖州市经济技术开发区龙王山路1236号2幢C509变更为266000 山东省青岛市李沧区大崂路1020号二单元302户
5 2015-10-14 实质审查的生效 IPC(主分类): A24B 5/16 专利申请号: 201510249706.6 申请日: 2015.05.18
6 2015-09-16 公开
权利要求
权利要求书是申请文件最核心的部分,是申请人向国家申请保护他的发明创造及划定保护范围的文件。
1.一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
(1)取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌接种于含有海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
(2)摇床培养,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释
15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂;
(3)称取梗丝,取菌剂喷洒到梗丝上,密封,30℃下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于恒温恒湿箱平衡;
其中,所述步骤(1)中,嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
所述步骤(2)摇床培养为:在37℃摇床,转速160r/min振荡培养至OD值=2.2;3800r/min离心8min;
所述步骤(3)为取0.12-0.15倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上,在20-22℃相对湿度为
50%-60%的恒温恒湿箱中平衡48h。
说明书

技术领域

[0001] 本发明属于烟用添加剂的技术领域,特别是嗜酸小球菌用于烟梗处理提香的方法。

背景技术

[0002] 烟草是茄科烟草属植物,烟梗即是烟叶之粗硬叶脉,约占叶重的 2 5— 30 %。烟梗是烟草工业的副产物,目前多作弃置处理。我国是烟草大国 ,每年有数十万吨烟梗资源被废弃,既造成环境污染 ,同时也是对自然资源的浪费。研究表明,烟梗中含有的成分种类与烟叶成分基本一致。在配方中加入膨胀梗丝后,由于其填充值较高,可以减少卷烟烟丝用量,不仅节约卷烟成本,也可以起到降低卷烟焦油量的作用。
[0003] 烟梗的主要成分是细胞壁物质,约占40%以上,其包括木质素、纤维素、半纤维素和果胶等。这类物质的热裂解产物具有强烈的刺激性,杂气重、呛咳、涩口、香气量少,严重影响了卷烟的吸味品质,直接限制了梗丝在叶组配方中所占的比例。因此,降低梗丝燃烧产生的不良气息,提高梗丝吸味是提高梗丝综合利用率的关键问题。
[0004] 现有技术表明,通过微生物或生物酶处理具有明显消除烟叶的青杂气,减轻刺激性的作用,对烟叶香气质量的改善也有一定的帮助。利用木质素降解菌和降解酶对烟梗进行处理能减轻梗丝的木质气、刺激性。尤其是现有技术公开了一种短小芽孢杆菌Van35,其能直接处理烟梗,改善其品质。
[0005] 本发明旨在提供一种新的烟梗微生物处理方法,本产品与现有技术相比,具有更好的烟梗提香的效果,并且其来源不仅仅限制于保藏的某特殊菌株。

发明内容

[0006] 本发明的目的是提供一种新的烟梗微生物处理方法,本产品与现有技术相比,具有更好的烟梗提香的效果,并且其来源不仅仅限制于保藏的某特殊菌株,原材料成本低廉,易于购买,制备方法简单,适于大量生产。
[0007] 为了实现上述的目的,本发明采用了以下的技术方案:
[0008] 一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
[0009] (1)取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
[0010] (2)在37℃摇床,转速160r/min振荡培养至OD值=2.2;3800rpm/min离心8min,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂;
[0011] (3)称取梗丝,取0.12-0.15倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上,密封,30℃下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于20-22℃相对湿度为50%-60%的恒温恒湿箱平衡48h。
[0012] 嗜酸小球菌( Pediococcus acidilactici ) 是一种乳酸菌,作为畜饲用添加剂的生产和使用已经得到中国和欧盟的认证,并可应用于美国和巴西等许多国家和地区,其安全性已得到国际主要权威机构(如美国FDA、欧盟SCAN 等) 的认证,是被选择用来改善动物消化道微生态系统的绿色、安全、环保的新型饲料添加剂。
[0013] 枯草芽胞杆菌,是芽胞杆菌属的一种。单个细胞0.7~0.8×2~3微米,着色均匀。无荚膜,周生鞭毛,能运动。革兰氏阳性菌,芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时,常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛,对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。
广泛分布在土壤及腐败的有机物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名。
[0014] 本发明人意外发现,这两种菌株混合培养成菌剂后,能够处理烟梗达到提香的效果。
[0015] 本发明的有益之处在于:
[0016] 1.本产品与现有技术相比,来源菌株易于购买得到,并且成本低廉,易于生产。
[0017] 2.本发明的处理方法对烟梗的提香效果极佳,可大大改善烟梗的利用度。

实施方案

[0018] 本发明的菌剂均为商业购买获得。
[0019] 实施例1:
[0020] 一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
[0021] 取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于额外含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
[0022] 在37℃摇床,转速160r/min振荡培养上述培养基至OD值=2.2;3800rpm/min离心8min,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂;
[0023] 称取梗丝,取0.12倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上,密封,30℃下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于20℃相对湿度为50%的恒温恒湿箱平衡48h。
[0024] 根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著)配制每升LB培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
[0025] 胰蛋白胨10g
[0026] 酵母提取物5g
[0027] NaCl 10g
[0028] 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌21min.
[0029] 实施例2:
[0030] 一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
[0031] 取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
[0032] 在37℃摇床,转速160r/min振荡培养上述培养基至OD值=2.2;3800rpm/min离心8min,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂;
[0033] 称取梗丝,取0.15倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上,密封,30℃下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于22℃相对湿度为60%的恒温恒湿箱平衡48h。
[0034] 根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著)配制每升LB培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
[0035] 胰蛋白胨10g
[0036] 酵母提取物5g
[0037] NaCl 10g
[0038] 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌21min.
[0039] 实施例3:
[0040] 一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
[0041] 取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
[0042] 在37℃摇床,转速160r/min振荡培养上述培养基至OD值=2.2;3800rpm/min离心8min,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂;
[0043] 称取梗丝,取0.13倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上,密封,30℃下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于21℃相对湿度为55%的恒温恒湿箱平衡48h。
[0044] 根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著)配制每升LB培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
[0045] 胰蛋白胨10g
[0046] 酵母提取物5g
[0047] NaCl 10g
[0048] 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌21min.
[0049] 实施例4:
[0050] 一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
[0051] 取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
[0052] 在37℃摇床,转速160r/min振荡培养上述培养基至OD值=2.2;3800rpm/min离心8min,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂;
[0053] 称取梗丝,取0.14倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上,密封,30℃下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于22℃相对湿度为58%的恒温恒湿箱平衡48h。
[0054] 根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著)配制每升LB培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
[0055] 胰蛋白胨10g
[0056] 酵母提取物5g
[0057] NaCl 10g
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