[0048] 为了使本发明的目的、技术方案和有点更加清楚，下面以汤臣倍健牌蛋白粉、千林牌蛋白粉、康恩贝牌蛋白粉和待鉴别蛋白粉1、2为例来说明利用该电化学指纹图谱鉴别蛋白粉品牌及真假。在相同的实验条件下，每个品牌蛋白粉测定5个样本。
[0049] 实施例1：
[0050] 一种蛋白粉的电化学指纹图谱检测方法，包括以下步骤：
[0051] A、建立蛋白粉化学成分的电化学指纹图谱：
[0052] ⅰ、将同一品牌同一种蛋白粉不同批次的蛋白粉作为标准样品，在60℃条件下，干燥1h，然后自然冷却；
[0053] ⅱ、准确称取0.2g干燥冷却后的蛋白粉并置于消解罐中，并向其中加入混合溶液，再向混合溶液中加入非离子表面活性剂和复合酶，然后将消解罐置于微波消解仪中进行消解，采用功率1200W，进行第一次升温，2min内升温至25℃，并在温度为35℃的条件下驻留2min；进行第二次升温，1min内由35℃，并在温度为50℃的条件下驻留30min；
[0054] ⅲ、将消解罐从微波消解仪中取出，并将消解罐中的混合液体转至带有磁力搅拌器的恒温水浴杯中，相继加入12mL浓度为0.080mol/L的硫酸锰溶液、8mL浓度为4mol/L的硫酸溶液和5mL浓度为1mol/L的丙酮溶液作为反应底液；
[0055] ⅳ、开启磁力搅拌器，调节转速为450r/min，在另一个恒温水浴杯中加入10mL浓度为0.40mol/L的溴酸钾溶液，在37℃的温度下恒温静置10min后，将溴酸钾溶液倒入反应底液；
[0056] ⅴ、用电化学工作站记录电压-时间曲线，以绘制出蛋白粉的电化学指纹图谱；
[0057] B、检测样品：
[0058] 取待检测的蛋白粉样品，使用与标准样品相同的前处理条件，得出检测样品的图谱，将两者的指纹图谱用直接观察并且以Origin软件分析作为定性依据；
[0059] C、重现性考察：
[0060] 取待检测的蛋白粉样品，测定其图谱，测得的电化学指纹图谱的各种特征参数的RSD＜3％，表明所述方法具有很好的重现性；
[0061] 进一步，所述电化学指纹图谱法包括如下步骤：
[0062] A-1、标准样品选择：
[0063] 同一产地同一品牌的蛋白粉，以4-8个批次为标准样品；
[0064] A-2、电化学指纹法图谱分析条件：
[0065] 检测仪器：瑞士万通204N型电化学工作站，TRANSFORM800微波消解仪、HH-501型超级恒温水浴锅，85-2A型数显恒温磁力搅拌器，213型金属铂电极和217型甘汞电极；
[0066] A-3、电化学指纹图谱信息参数分析：
[0067] 用Origin软件绘制电压-时间（E-t）曲线，即获得蛋白粉电化学指纹图谱以及其特征参数；
[0068] 其中，图谱参数包括：
[0069] 诱导时间(s)：从加入试剂到振荡发生的时间；
[0070] 振荡寿命(s)：振荡开始到振荡结束的时间；
[0071] 最大振幅(v)：振荡过程中相邻电位正峰和负峰之间的最大差值；
[0072] 振荡周期(s)：振荡过程中出现相邻峰的时间；
[0073] 最高电位(v)；振荡曲线的电位最高值；
[0074] 最低电位(v)；振荡曲线的电位最低值；
[0075] 平衡电位(v)；体系达到热力学平衡时的电位；
[0076] 测得的电化学指纹图谱的各种特征参数的RSD＜3％；
[0077] B、检测样品：
[0078] 取待检测的蛋白粉样品，使用与标准样品相同的条件检测，得出检测样品的指纹图谱，将两者的指纹图谱直接观察并且以Origin软件分析作为定性依据，如果两者的图谱特征参数的RSD＜10％，可认为是同一产品，若RSD＞10％则认为是非同一产品；
[0079] C、重现性考察：
[0080] 取6份待测蛋白粉样品，测定其图谱并进行考察。
[0081] 表面活性剂选用椰油基葡糖苷或鲸蜡硬脂基葡糖苷，且表面活性剂的加入量为混合溶液总质量的3%。
[0082] 复合酶的加入量为3000U/g蛋白粉，且复合酶由木瓜蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、氨肽酶和二肽酶按照质量比2:2:1:1混合而成。
[0083] 实施例2：
[0084] 一种蛋白粉的电化学指纹图谱检测方法，包括以下步骤：
[0085] A、建立蛋白粉化学成分的电化学指纹图谱：
[0086] ⅰ、将同一品牌同一种蛋白粉不同批次的蛋白粉作为标准样品，在70℃条件下，干燥4h，然后自然冷却；
[0087] ⅱ、准确称取0.8g干燥冷却后的蛋白粉并置于消解罐中，并向其中加入混合溶液，再向混合溶液中加入非离子表面活性剂和复合酶，然后将消解罐置于微波消解仪中进行消解，采用功率1200W，进行第一次升温，2min内升温至30℃，并在温度为35℃的条件下驻留2min；进行第二次升温，1min内由45℃，并在温度为50℃的条件下驻留35min；
[0088] ⅲ、将消解罐从微波消解仪中取出，并将消解罐中的混合液体转至带有磁力搅拌器的恒温水浴杯中，相继加入12mL浓度为0.080mol/L的硫酸锰溶液、8mL浓度为4mol/L的硫酸溶液和5mL浓度为1mol/L的丙酮溶液作为反应底液；
[0089] ⅳ、开启磁力搅拌器，调节转速为550r/min，在另一个恒温水浴杯中加入10mL浓度为0.40mol/L的溴酸钾溶液，在37℃的温度下恒温静置10min后，将溴酸钾溶液倒入反应底液；
[0090] ⅴ、用电化学工作站记录电压-时间曲线，以绘制出蛋白粉的电化学指纹图谱；
[0091] B、检测样品：
[0092] 取待检测的蛋白粉样品，使用与标准样品相同的前处理条件，得出检测样品的图谱，将两者的指纹图谱用直接观察并且以Origin软件分析作为定性依据；
[0093] C、重现性考察：
[0094] 取待检测的蛋白粉样品，测定其图谱，测得的电化学指纹图谱的各种特征参数的RSD＜3％，表明所述方法具有很好的重现性；
[0095] 进一步，所述电化学指纹图谱法包括如下步骤：
[0096] A-1、标准样品选择：
[0097] 同一产地同一品牌的蛋白粉，以4-8个批次为标准样品；
[0098] A-2、电化学指纹法图谱分析条件：
[0099] 检测仪器：瑞士万通204N型电化学工作站，TRANSFORM800微波消解仪、HH-501型超级恒温水浴锅，85-2A型数显恒温磁力搅拌器，213型金属铂电极和217型甘汞电极；
[0100] A-3、电化学指纹图谱信息参数分析：
[0101] 用Origin软件绘制E-t曲线，即获得蛋白粉电化学指纹图谱以及其特征参数；
[0102] 其中，图谱参数包括：
[0103] 诱导时间(s)：从加入试剂到振荡发生的时间；
[0104] 振荡寿命(s)：振荡开始到振荡结束的时间；
[0105] 最大振幅(v)：振荡过程中相邻电位正峰和负峰之间的最大差值；
[0106] 振荡周期(s)：振荡过程中出现相邻峰的时间；
[0107] 最高电位(v)；振荡曲线的电位最高值；
[0108] 最低电位(v)；振荡曲线的电位最低值；
[0109] 平衡电位(v)；体系达到热力学平衡时的电位；
[0110] 测得的电化学指纹图谱的各种特征参数的RSD＜3％；
[0111] B、检测样品：
[0112] 取待检测的蛋白粉样品，使用与标准样品相同的条件检测，得出检测样品的指纹图谱，将两者的指纹图谱直接观察并且以Origin软件分析作为定性依据，如果两者的图谱特征参数的RSD＜10％，可认为是同一产品，若RSD＞10％则认为是非同一产品；
[0113] C、重现性考察：
[0114] 取6份待测蛋白粉样品，测定其图谱并进行考察。
[0115] 优选的，所述表面活性剂选用椰油基葡糖苷或鲸蜡硬脂基葡糖苷，且表面活性剂的加入量为混合溶液总质量的4%。
[0116] 复合酶的加入量为5000U/g蛋白粉，且复合酶由木瓜蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、氨肽酶和二肽酶按照质量比2:2:1:1混合而成。
[0117] 实施例3：
[0118] 一种蛋白粉的电化学指纹图谱检测方法，包括以下步骤：
[0119] A、建立蛋白粉化学成分的电化学指纹图谱：
[0120] ⅰ、将同一品牌同一种蛋白粉不同批次的蛋白粉作为标准样品，在80℃条件下，干燥6h，然后自然冷却；
[0121] ⅱ、准确称取1.2g干燥冷却后的蛋白粉并置于消解罐中，并向其中加入混合溶液，再向混合溶液中加入非离子表面活性剂和复合酶，然后将消解罐置于微波消解仪中进行消解，采用功率1200W，进行第一次升温，2min内升温至35℃，并在温度为35℃的条件下驻留2min；进行第二次升温，1min内由50℃，并在温度为50℃的条件下驻留40min；
[0122] ⅲ、将消解罐从微波消解仪中取出，并将消解罐中的混合液体转至带有磁力搅拌器的恒温水浴杯中，相继加入12mL浓度为0.080mol/L的硫酸锰溶液、8mL浓度为4mol/L的硫酸溶液和5mL浓度为1mol/L的丙酮溶液作为反应底液；
[0123] ⅳ、开启磁力搅拌器，调节转速为600r/min，在另一个恒温水浴杯中加入10mL浓度为0.40mol/L的溴酸钾溶液，在37℃的温度下恒温静置10min后，将溴酸钾溶液倒入反应底液；
[0124] ⅴ、用电化学工作站记录电压-时间曲线，以绘制出蛋白粉的电化学指纹图谱；
[0125] B、检测样品：
[0126] 取待检测的蛋白粉样品，使用与标准样品相同的前处理条件，得出检测样品的图谱，将两者的指纹图谱用直接观察并且以Origin软件分析作为定性依据；
[0127] C、重现性考察：
[0128] 取待检测的蛋白粉样品，测定其图谱，测得的电化学指纹图谱的各种特征参数的RSD＜3％，表明所述方法具有很好的重现性；
[0129] 进一步，所述电化学指纹图谱法包括如下步骤：
[0130] A-1、标准样品选择：
[0131] 同一产地同一品牌的蛋白粉，以4-8个批次为标准样品；
[0132] A-2、电化学指纹法图谱分析条件：
[0133] 检测仪器：瑞士万通204N型电化学工作站，TRANSFORM800微波消解仪、HH-501型超级恒温水浴锅，85-2A型数显恒温磁力搅拌器，213型金属铂电极和217型甘汞电极；
[0134] A-3、电化学指纹图谱信息参数分析：
[0135] 用Origin软件绘制E-t曲线，即获得蛋白粉电化学指纹图谱以及其特征参数；
[0136] 其中，图谱参数包括：
[0137] 诱导时间(s)：从加入试剂到振荡发生的时间；
[0138] 振荡寿命(s)：振荡开始到振荡结束的时间；
[0139] 最大振幅(v)：振荡过程中相邻电位正峰和负峰之间的最大差值；
[0140] 振荡周期(s)：振荡过程中出现相邻峰的时间；
[0141] 最高电位(v)；振荡曲线的电位最高值；
[0142] 最低电位(v)；振荡曲线的电位最低值；
[0143] 平衡电位(v)；体系达到热力学平衡时的电位；
[0144] 测得的电化学指纹图谱的各种特征参数的RSD＜3％；
[0145] B、检测样品：
[0146] 取待检测的蛋白粉样品，使用与标准样品相同的条件检测，得出检测样品的指纹图谱，将两者的指纹图谱直接观察并且以Origin软件分析作为定性依据，如果两者的图谱特征参数的RSD＜10％，可认为是同一产品，若RSD＞10％则认为是非同一产品；
[0147] C、重现性考察：
[0148] 取6份待测蛋白粉样品，测定其图谱并进行考察。
[0149] 表面活性剂选用椰油基葡糖苷或鲸蜡硬脂基葡糖苷，且表面活性剂的加入量为混合溶液总质量的5%。
[0150] 复合酶的加入量为8000U/g蛋白粉，且复合酶由木瓜蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、氨肽酶和二肽酶按照质量比2:2:1:1混合而成。
[0151] 图谱特征参数：
[0152] 表1标准样品和待鉴定样品的电化学指纹
[0153]
[0154] 表2 待鉴定样品与标准样品的整体相似度比较
[0155]
[0156] 综上可知：待鉴定样品1为汤臣倍健牌蛋白粉，待鉴定样品2为除汤臣倍健、康恩贝和千林以外的其他品牌的蛋白粉。
[0157] 以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
