[0043] 下面结合实施例对本发明作进一步的描述。
[0044] 实施例1：
[0045] 1）荧光碳点（CDs）的制备：分别量取10mL的去离子水和无水乙醇（体积比1:1），混合溶解在烧杯中，加入0.40 g果糖，搅拌至完全溶解。将混合溶液倒入水热反应釜中密封，置于160℃烘箱中加热2 h，待溶液变为浅黄色，反应完成，自然冷却至室温，得到荧光碳点溶液；将得到的溶液用透析袋（截留分子量 1000）透析24h以除去其他小分子杂质；最后对纯化的碳点溶液进行冷冻干燥，可得到荧光碳点粉末。
[0046] 2）荧光碳点标记蚕丝丝素蛋白二抗的制备：将荧光碳点、碳化二亚胺和二抗加入按1:20:20的质量比加入10mmol/L的PBS缓冲液中，在室温条件下搅拌2 h后，用PBS缓冲液对溶液进行多次洗涤离心，即可得到荧光碳点标记的蚕丝丝素蛋白二抗。
[0047] 3）称取0.3g现代蚕丝作为对照样品，以1:100的浴比在含有0.5% Na2PO4和1%C17H35COONa的混合溶液中煮沸30min，进行脱胶处理，共脱胶两次；脱胶之后，将蚕丝用去离子水搓洗4次以上，放入烘箱干燥，得到现代蚕丝丝素纤维。将现代蚕丝丝素纤维，以1:50的浴比浸入[AMIM]Cl离子液体中，加热反应一定时间，冷却；加入PM13-碱性蛋白酶粉末恒温孵育6h，进行灭酶，得到丝素蛋白/离子液体溶液A。
[0048] 其中，所述PM13-碱性蛋白酶的制备方法为：向100mL的0.1M的硼酸钠缓冲溶液中加入0.15g碱性蛋白酶和3.75g的MW15000的梳状PEG，在4℃条件下缓慢搅拌1h，再外加50mL 1mmol/L HCl的条件下超滤除去未反应的PM13，重复三次，将滤液进行冷冻干燥，得到PM13-碱性蛋白酶粉末。
[0049] 4）称取30g带有古代泥化丝织品的土样，用研钵研磨后，加入60mL [AMIM]Cl离子液体中，按照3）中步骤操作，得到离子液体悬浮液。将悬浮液进行高速冷冻离心，上层清液即丝素蛋白/离子液体溶液B。
[0050] 5）在丝素蛋白/离子液体溶液A、B中加入无水乙醇，使蛋白析出，滤出蛋白，加入去离子水溶解，得到纯净的丝素蛋白提取液A、B。
[0051] 6）将得到的两种提取液在4℃条件下用透析袋（截留分子量1000）透析48 h，除去小分子杂质；利用真空浓缩仪浓缩丝素蛋白水溶液至终体积约为200μL。
[0052] 7）SDS-PAGE凝胶电泳：分别量取50μL丝素蛋白浓缩液A、B，用CB 9.6缓冲液稀释至5mL，在100℃条件下加热5min，进行变性处理；冷却后至室温后，将两种样品和蛋白质Marker加入制备好的免染胶（上层为浓缩胶，下层为分离胶）加样孔中，在电解槽中加满电解液，电泳完成后，可在成像系统中观察电泳图像。其中，电泳具体操作为：先恒压80V，
10min后蛋白进入分离胶，调整恒定电压为120V，20min后电泳完成。
[0053] 8）电转移：将电泳后的胶平铺在经甲醇和电转缓冲液处理过的PVDF膜上，夹在滤纸和海绵中间组装成转运夹层，所用的滤纸、海绵需要用电转缓冲液浸润，按照海绵—滤纸—电泳凝胶—PVDF膜—滤纸—海绵的顺序组装转运夹层，放入湿式转膜装置中，在100mA恒流下转膜1 h，转移过程中放热，需将转膜装置放在冰浴中。
[0054] 9）膜成像：电转移完成后，用镊子取出PVDF膜，放入凝胶成像系统中成像，观察蛋白条带转移情况。
[0055] 10）封闭：取出PVDF膜，用15mL的TBS液洗膜5min，用封闭液（5%脱脂奶粉）在室温条件下处理1h。
[0056] 11）免疫处理：用抗体稀释液（TBST液）以1:1000的比例稀释一抗，将膜浸没在一抗稀释液中，室温条件下摇床孵育1 h；取出膜后，室温下在摇床上用TBST液洗膜三次，每次五分钟，之后浸入10mL以1:1000的比例稀释的荧光碳点标记的二抗液中，室温条件下孵育1.5 h，取出膜后，室温下在摇床上用TBST液洗膜三次，每次五分钟。
[0057] 12）发光显色：直接将免疫处理后的膜在凝胶成像系统中成像，利用荧光碳点在紫外光照射下发射荧光的性能，得到免疫印迹图像。如果两样品都得荧光条带，说明古代泥化丝织品属于蚕丝；如果只有现代蚕丝具有荧光条带，说明古代泥化丝织品不属于蚕丝。
[0058] 实施例2：
[0059] 1）荧光碳点（CDs）的制备：分别量取10mL的去离子水和无水乙醇（体积比1:1），混合溶解在烧杯中，加入0.40 g果糖，搅拌至完全溶解。将混合溶液倒入水热反应釜中密封，置于160℃烘箱中加热2.5 h，待溶液变为浅黄色，反应完成，自然冷却至室温，得到荧光碳点溶液；将得到的溶液用透析袋（截留分子量 1000）透析24 h以除去其他小分子杂质；最后对纯化的碳点溶液进行冷冻干燥，可得到荧光碳点粉末。
[0060] 2）荧光碳点标记蚕丝丝素蛋白二抗的制备：将荧光碳点、碳化二亚胺和二抗加入按1:20:20的质量比加入10mmol/L的PBS缓冲液中，在室温条件下搅拌2.5 h后，用PBS缓冲液对溶液进行多次洗涤离心，即可得到荧光碳点标记的蚕丝丝素蛋白二抗。
[0061] 3）称取0.3g现代蚕丝作为对照样品，以1:100的浴比在含有0.5% Na2PO4和1% C17H35COONa的混合溶液中煮沸30min，进行脱胶处理，共脱胶两次；脱胶之后，将蚕丝用去离子水搓洗4次以上，放入烘箱干燥，得到蚕丝丝素纤维。现代蚕丝丝素纤维，以1:50的浴比浸入[AMIM]Cl离子液体中，加热反应一定时间，冷却；加入PM13-碱性蛋白酶粉末恒温孵育6h，进行灭酶，得到丝素蛋白/离子液体溶液A。
[0062] 其中，所述PM13-碱性蛋白酶的制备方法为：向100mL的0.1M的硼酸钠缓冲溶液中加入0.15g碱性蛋白酶和3.75g的MW15000的梳状PEG，在4℃条件下缓慢搅拌1h，再外加50mL 1mmol/L HCl的条件下超滤除去未反应的PM13，重复三次，将滤液进行冷冻干燥，得到PM13-碱性蛋白酶粉末。
[0063] 4）称取30g带有古代泥化丝织品的土样，用研钵研磨后，加入60mL [AMIM]Cl离子液体中，按照3）中步骤操作，得到离子液体悬浮液。将悬浮液进行高速冷冻离心，上层清液即丝素蛋白/离子液体溶液B。
[0064] 5）在丝素蛋白/离子液体溶液A、B中加入无水乙醇，使蛋白析出，滤出蛋白，加入去离子水溶解，得到纯净的丝素蛋白提取液A、B。
[0065] 6）将得到的两种提取液在4℃条件下用透析袋（截留分子量1000）透析48 h，除去小分子杂质；利用真空浓缩仪浓缩丝素蛋白水溶液至终体积约为200μL。
[0066] 7）SDS-PAGE凝胶电泳：分别量取50μL丝素蛋白浓缩液A、B，用CB 9.6缓冲液稀释至5mL，在100℃条件下加热5min，进行变性处理；冷却后至室温后，将两种样品和蛋白质Marker加入制备好的免染胶（上层为浓缩胶，下层为分离胶）加样孔中，在电解槽中加满电解液，电泳完成后，可在成像系统中观察电泳图像。其中，电泳具体操作为：先恒压80V，
10min后蛋白进入分离胶，调整恒定电压为120V，20min后电泳完成。
[0067] 8）电转移：将电泳后的胶平铺在经甲醇和电转缓冲液处理过的PVDF膜上，夹在滤纸和海绵中间组装成转运夹层，所用的滤纸、海绵需要用电转缓冲液浸润，按照海绵—滤纸—电泳凝胶—PVDF膜—滤纸—海绵的顺序组装转运夹层，放入湿式转膜装置中，在100mA恒流下转膜1.5 h，转移过程中放热，需将转膜装置放在冰浴中。
[0068] 9）膜成像：电转移完成后，用镊子取出PVDF膜，放入凝胶成像系统中成像，观察蛋白条带转移情况。
[0069] 10）封闭：取出PVDF膜，用15mL的TBS液洗膜5min，用封闭液（5%脱脂奶粉）在室温条件下处理1h。
[0070] 11）免疫处理：用抗体稀释液（TBST液）以1:1000的比例稀释一抗，将膜浸没在一抗稀释液中，室温条件下摇床孵育1.5 h；取出膜后，室温下在摇床上用TBST液洗膜三次，每次五分钟，之后浸入10mL以1:2000的比例稀释的荧光碳点标记的二抗液中，室温条件下孵育1.5 h，取出膜后，室温下在摇床上用TBST液洗膜三次，每次五分钟。
[0071] 12）发光显色：直接将免疫处理后的膜在凝胶成像系统中成像，利用荧光碳点在紫外光照射下发射荧光的性能，得到免疫印迹图像。如果两样品都得荧光条带，说明古代泥化丝织品属于蚕丝；如果只有现代蚕丝具有荧光条带，说明古代泥化丝织品不属于蚕丝。
[0072] 实施例3：
[0073] 1）荧光碳点（CDs）的制备：分别量取10mL的去离子水和无水乙醇（体积比1:1），混合溶解在烧杯中，加入0.40 g果糖，搅拌至完全溶解。将混合溶液倒入水热反应釜中密封，置于160℃烘箱中加热3 h，待溶液变为浅黄色，反应完成，自然冷却至室温，得到荧光碳点溶液；将得到的溶液用透析袋（截留分子量1000）透析24 h以除去其他小分子杂质；最后对纯化的碳点溶液进行冷冻干燥，可得到荧光碳点粉末。
[0074] 2）荧光碳点标记蚕丝丝素蛋白二抗的制备：将荧光碳点、碳化二亚胺和二抗加入按1:20:20的质量比加入10mmol/L的PBS缓冲液中，在室温条件下搅拌2 3 h后，用PBS缓冲~液对溶液进行多次洗涤离心，即可得到荧光碳点标记的蚕丝丝素蛋白二抗。
[0075] 3）称取0.3g现代蚕丝作为对照样品，以1:100的浴比在含有0.5% Na2PO4和1%C17H35COONa的混合溶液中煮沸30min，进行脱胶处理，共脱胶两次；脱胶之后，将蚕丝用去离子水搓洗4次以上，放入烘箱干燥，得到蚕丝丝素纤维。现代蚕丝丝素纤维，以1:50的浴比浸入[AMIM]Cl离子液体中，加热反应一定时间，冷却；加入PM13-碱性蛋白酶粉末恒温孵育6h，进行灭酶，得到丝素蛋白/离子液体溶液A。
[0076] 其中，所述PM13-碱性蛋白酶的制备方法为：向100mL的0.1M的硼酸钠缓冲溶液中加入0.15g碱性蛋白酶和3.75g的MW15000的梳状PEG，在4℃条件下缓慢搅拌1h，再外加50mL 1mmol/L HCl的条件下超滤除去未反应的PM13，重复三次，将滤液进行冷冻干燥，得到PM13-碱性蛋白酶粉末。
[0077] 4）称取30g带有古代泥化丝织品的土样，用研钵研磨后，加入60mL [AMIM]Cl离子液体中，按照3）中步骤操作，得到离子液体悬浮液。将悬浮液进行高速冷冻离心，上层清液即丝素蛋白/离子液体溶液B。
[0078] 5）在丝素蛋白/离子液体溶液A、B中加入无水乙醇，使蛋白析出，滤出蛋白，加入去离子水溶解，得到纯净的丝素蛋白提取液A、B。
[0079] 6）将得到的两种提取液在4℃条件下用透析袋（截留分子量1000）透析48 h，除去小分子杂质；利用真空浓缩仪浓缩丝素蛋白水溶液至终体积约为200μL。
[0080] 7）SDS-PAGE凝胶电泳：分别量取50μL丝素蛋白浓缩液A、B，用CB 9.6缓冲液稀释至5mL，在100℃条件下加热5min，进行变性处理；冷却后至室温后，将两种样品和蛋白质Marker加入制备好的免染胶（上层为浓缩胶，下层为分离胶）加样孔中，在电解槽中加满电解液，电泳完成后，可在成像系统中观察电泳图像。其中，电泳具体操作为：先恒压80V，
10min后蛋白进入分离胶，调整恒定电压为120V，20min后电泳完成。
[0081] 8）电转移：将电泳后的胶平铺在经甲醇和电转缓冲液处理过的PVDF膜上，夹在滤纸和海绵中间组装成转运夹层，所用的滤纸、海绵需要用电转缓冲液浸润，按照海绵—滤纸—电泳凝胶—PVDF膜—滤纸—海绵的顺序组装转运夹层，放入湿式转膜装置中，在100mA恒流下转膜2 h，转移过程中放热，需将转膜装置放在冰浴中。
[0082] 9）膜成像：电转移完成后，用镊子取出PVDF膜，放入凝胶成像系统中成像，观察蛋白条带转移情况。
[0083] 10）封闭：取出PVDF膜，用15mL的TBS液洗膜5min，用封闭液（5%脱脂奶粉）在室温条件下处理1h。
[0084] 11）免疫处理：用抗体稀释液（TBST液）以1:1000的比例稀释一抗，将膜浸没在一抗稀释液中，室温条件下摇床孵育2 h；取出膜后，室温下在摇床上用TBST液洗膜三次，每次五分钟，之后浸入10mL以1:3000的比例稀释的荧光碳点标记的二抗液中，室温条件下孵育1.5 h，取出膜后，室温下在摇床上用TBST液洗膜三次，每次五分钟。
[0085] 12）发光显色：直接将免疫处理后的膜在凝胶成像系统中成像，利用荧光碳点在紫外光照射下发射荧光的性能，得到免疫印迹图像。如果两样品都得荧光条带，说明古代泥化丝织品属于蚕丝；如果只有现代蚕丝具有荧光条带，说明古代泥化丝织品不属于蚕丝。
[0086] 本发明中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备；本发明中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。
[0087] 以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何限制，凡是根据本发明技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效变换，均仍属于本发明技术方案的保护范围。
