卷枝毛霉MF-8及其提高土茯苓中花旗松素含量的应用   0    0

本发明公开了一种卷枝毛霉MF‑8及其提高土茯苓中花旗松素含量的应用，将卷枝毛霉MF‑8经产酶培养的发酵液过滤，取滤液为粗酶液，加入经粉碎的土茯苓粉，在30‑35℃的振荡条下转化反应24‑36h，过滤除去粗酶液，滤饼经烘干，即得富含花旗松素的土茯苓。本发明筛选的卷枝毛霉MF‑8使土茯苓中的花旗松素含量提高幅度大，最高可达28.1倍，含量由原来的0.247mg/g提高到7.19mg/g；本发明具有专一性好，产物得率高，生物催化剂的成本低的优势，实现土茯苓中药效成分原位转化。

1.卷枝毛霉(Mucor circinelloides)MF‑8，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：GDMCC No:60920，保藏日期2019年12月18日，地址：广东省广州市先烈中路100号大院
59号楼5楼；邮编：510070。

2.一种权利要求1所述卷枝毛霉MF‑8提高土茯苓中花旗松素含量的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述应用的方法为：将卷枝毛霉MF‑8经产酶培养的发酵液过滤，取滤液为粗酶液，加入经粉碎的土茯苓粉，在30–35℃的振荡条下转化反应24–36h，过滤除去粗酶液，滤饼经烘干，即得富含花旗松素的土茯苓。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述转化反应条件为30–35℃、150–200r/min条件下振荡24–36h。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述粗酶液体积加入量以土茯苓重量计为10–
50mL/g，所述土茯苓在加入前需粉碎过80目筛。

6.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述滤饼干燥条件为85–105℃、6–10h。

7.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述粗酶液的制备方法为：将卷枝毛霉MF‑8接种于产酶培养基中，于28–30℃、150–200r/min恒温振荡条件下培养2–3d，将发酵液过滤，收集滤液，即为粗酶液；所述的产酶培养基终浓度组成为：落新妇苷1–2g/L，葡萄糖20–40g/L，酵母浸粉10–15g/L，蛋白胨5–10g/L，NaNO3 10–16g/L，KH2PO4 5g/L，NaCl 5g/L，MgSO4·7H2O 
1g/L，MnSO4·H2O 0.5g/L，溶剂为自来水，初始pH 5.0–7.0。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于所述产酶培养基组成为：落新妇苷1g/L，葡萄糖40g/L，酵母浸粉10g/L，蛋白胨5g/L，NaNO3 16g/L，KH2PO4 5g/L，NaCl 5g/L，MgSO4·7H2O 
1g/L，MnSO4·H2O 0.5g/L，溶剂为自来水，pH 6.5。

9.如权利要求7所述的应用，其特征在于所述卷枝毛霉MF‑8在发酵前，需要先经平板培养基活化培养制备孢子，或经过种子培养基扩大培养制备种子液，然后用孢子或种子液以体积浓度3％–5％的接种量接入产酶培养基进行产酶培养：
(1)活化培养：将卷枝毛霉MF‑8接种于PDA平板培养基，于28–30℃恒温培养2–3d，获得卷枝毛霉MF‑8孢子；所述的PDA平板培养基终浓度组成为：马铃薯200g/L，蔗糖20g/L，琼脂
20g/L，溶剂为自来水，pH自然；
(2)种子扩大培养：挑取步骤(1)活化培养后卷枝毛霉MF‑8孢子接种至种子培养基中，于28–30℃、150–200r/min恒温振荡条件下培养1–2d，得种子液；所述种子培养基组除不含琼脂外，成分和制备方法同步骤(1)中的PDA培养基。